Изменение №1 для МУ 1350-75
Методические указания по определению хлорорганических пестицидов в сырье для производства детских сухих молочных смесей

■ I С л * \ 3 j
T-: iV' / // ^    ,    J    T1    ‘    I)    * ■'r- .Sl^w/V/ /I A i i' ; ЙГ

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей

и благополучия человека

Сборник методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко

и молочную продукцию»

Часть 13

ББК 51.23 С23

С23 Сборник методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию».—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.—78 с.

ISBN 5—7508—0771—1

В сборник включены методические документы, содержащие правила и методы исследований (испытаний) и измерений, а также правила отбора образцов для проведения исследований (испытаний) и измерений, в соответствии с постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Г. Г. Онищенко от 08.12.2008 № 67.

ББК 51.23

© Роспотребнадзор, 2010 © Федеральный центр гигиены н

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010

УТВЕРЖДАЮ Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А. И. ЗАЙЧЕНКО 28 декабря 1982 г.

№ 2648-82

Методические указания

по определению дифоса (аббата) в продуктах животного происхождения методом тонкослойной хроматографии

(дополнение к № 1350-75)

1. Характеристика анализируемого пестицида

Дифос /0,0,0',0-тетраметил 0,0',-тио-ди(иарафенил)тиофосфат/ Структурная формула:

S    S

Эмпирическая формула - С₁₆Н₂оОбР28з-    М.м.    466

Синонимы: абат, абат500 Е, абат 4Е, ОМ S—736.

Химически чистое вещество - белые кристаллы. Технический препарат - коричневая жидкость, содержащая 90—95 % действующего вещества. Препарат нерастворим в воде, хорошо растворяется в органических растворителях (ацетоне, гексане, хлороформе, эфире, ацетонитриле). Устойчив к воздействию, слабых щелочей (при pH 8 и температуре 20 °С не гидролизуется в течение нескольких недель). Выпускается в форме 30 % к.э. Зарубежный аналог дифоса - абат выпускается в форме 50 % к,э. и 25 % о.п. Относится к малотоксичным соединениям. ЛД50 при введении препарата в желудок белых крыс составляет 1 360— 2 300 мг/кг, для белых мышей - 460 мг/кг. Проникает через кожу. Для кроликов при накожном нанесении ЛД50 970—1 930 мг/кг. Раздражающее действие выражено слабо. Коэффициент кумуляции - 5,7.

Применяется в качестве инсектицида контактно-кишечного действия. Высокоэффективен в борьбе с личинками комаров, мух, а также с вредными насекомыми домашних животных. Эффективен и для защиты

сельскохозяйственных культур от вредных клопов, трипсов и других насекомых. ДОК в сахарной свекле, овощах, цитрусовых и хлопковом масле - 0,3 мг/кг, в мясе и яйце - 1 мг/кг, в молоке - не допускается.

2. Методика определения дифоса в продуктах животного происхождения методом тонкослойной хроматографии

2,1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении препарата из тканей животного ацетоном, осаждении коэкстрактивных веществ из водно-ацетонового рас* твора уксуснокислым свинцом на холоду, последующем переэкстраги-ровании дифоса в гексан, хроматографировании на пластинках «силу-фол» в двух системах растворителей: Н-гексан-ацетон и диэтило вый эфир-1I-гексан. Для проявления хроматограмм применяют раствор бромфенолового синего и азотнокислого серебра с последующей обработкой лимонной кислотой. Количественное определение проводят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен препарата из анализируемых проб стандартных растворов

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

•    Диапазон определения концентраций 0,2—25 мкг дифоса в анализируемой пробе;

•    Предел обнаружения - 0,2 мкг или 0,02—0,05 мг/кг (мг/л);

® Размах варьирования - 70—90 %;

•    Среднее значение определения стандартных количеств дифоса-79,8 %;

•    Стандартное отклонение - 4,8;

•    Относительное стандартное отклонение - 0,06;

•    Доверительный интервал среднего при Р = 0,95 и п = 10 - 79,8 %.

2.2* Реактивы и материалы

Бромфеноловый синий, чда Серебро азотнокислое, ч

ТУ МГ УХП 271—59 ГОСТ 1277-75

---

Дифос - стандартный раствор в ацетоне, содержащий 100 мкг/мл препарата

2.3, Приборы, аппаратура и посуда

Пластинки «Силуфол» производства ЧССР Центрифуга лабораторная стационарная ИЛС-3 или аналогичная (объем стаканов 80—100 мл)

Шкаф вытяжной Шкаф сушильный

Аппарат для встряхивания АВУ-I или аналогичный Весы технические

Весы торсионные тип ВТ    ТУ 64-1-900—77

Посуда химическая:    ГОСТ 23932—79Е

/колбы конические с притертыми пробками -100 мл; воронки делительные - 200 мл; воронки конические - 5 см; пробирки мерные - 10 мл; цилиндры - 10,50,100 мл; пипетки, микропипетки, стаканы химические/

Чашки фарфоровые выпарительные дм 5—7 см Камеры хроматографические Камера для опрыскивания хроматограмм Опрыскиватели стеклянные

2.4. Подготовка к определению

2.4.1.    Приготовление 20 % водного раствора уксуснокислого свинца. 20 г уксуснокислого свинца растворяют в 80 мл дистиллированной воды. При использовании основного уксуснокислого свинца 20 г его растворяют при легком подогревании в 80 мл 5 % уксусной кислоты и pH раствора доводят едким натрием до 5,4—5,6. Хранят в закрытой посуде.

2.4.2.    Приготовление 10 % водного раствора уксусной кислоты.

10 мл ледяной уксусной кислоты смешивают с 90 мл дистиллиро-

ваннои воды.

2.4.3. Приготовление проявляющего реактива.

Реактив 1,25 мг бромфенолового синего растворяют в 5 мл ацетона и объем доводят до 50 мл 0,25 % раствором азотнокислого серебра /0,125 г азотнокислого серебра растворяют в 15 мл дистиллированной воды и добавляют 35 мл ацетона/. Хранят в закрытой посуде из темного стекла при температуре 4—6 °С в течение месяца.

Реактив 2,2 % раствор лимонной кислоты* 2 г лимонной кислоты растворяют в 98 мл дистиллированной воды. Хранят в закрытой посуде при температуре 4—6 °С в течение 5—6 дней.

2.4.4. Отбор проб производят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» утвержденных Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за № 2051*79.

2.5. Проведение определения

2.5.1.    Экстракция и очистка экстрактов.

Навеску мяса, печени, почек, легких, сердца по 10 г, жира 2—3 г измельчают ножницами и помещают в колбу с притертой пробкой, молока берут 10 мл. Пробы заливают 30 мл ацетона, тщательно перемешивают и экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 80 мин. Ацетоновый экстракт фильтруют в чистую колбу через воронку с ватным фильтром. Проб промывают 10 мл ацетона и пропускают через тот же фильтр. К объединенному ацетоновому экстракту приливают 20 мл дистиллированной воды. 2 мл раствора уксуснокислого свинца и помещают в испаритель холодильника на 1 час. /Экстракты жира лучше оставлять в испарителе холодильника на ночъ/. После этого содержимое переносят в центрифужные стаканы и центрифугируют на протяжении 3—5 мин при частоте вращения 3 000 мин'¹. Надосадочную жидкость сливают в чистую делительную воронку. /Если на поверхности экстракта имеются взвешенные частицы, его дополнительно фильтруют через воронку с ватным фильтром/. В делительную воронку добавляют 10 мл 10 % уксусной кислоты и 60 мл дистиллированной воды. Дифос реэкс-трагируют из этой смеси трижды Н-гексаном, используя каждый раз по 10 мл экстракта. При плохом разделении слоев, в связи с образованием эмульсии, добавляют 5 мл насыщенного раствора натрия сернокислого. Объединенные гексановые экстракты сушат над натрием сернокислым безводным в течение 10—15 мин. Упаривание экстракта проводят в вытяжном шкафу при комнатной температуре до объема 0,2-—0,3 мл.

2.5.2.    Хроматографирование.

Сконцентрированный гексановый экстракт наносят на пластинку «силуфола» на расстоянии 1,5 см от нижнего края и 3,5 см от правого вертикального края. Диаметр нанесенного пятна не должен превышать 0,5 см.

Для выявления дифоса используют двухмерную хроматографию. Сначала пластинку помещают в хроматографическую камеру горизонтально /на левый край/, куда налита смесь ацетона с гексаном /1 : 5/. После того, как фронт растворителей пройдет всю пластинку её подсушивают на воздухе и данную процедуру повторяют ещё дважды.

Слева от нанесенной пробы наносят на пластинку стандартный раствор дифоса. Пластинку помещают в вертикальном положении в камеру со смесью растворителей эфир-Н-гексан /1 : 2L Общий обьем подвижных растворитей в камере подбирают таким образом, чтобы хроматографические пластинки погружались на 0,4—0,5 см. После того, как фронт растворителей поднимется на высоту 10 см от старта, пластинку вынимают и сушат на воздухе.

2.5.3. Проявление.

После испарения растворителей пластинку опрыскивают бромфе-ноловым синим с азотнокислым серебром и помещают на 5 мин в сушильный шкаф при температуре 30°С. Затем пластинку опрыскивают раствором лимонной кислоты. Дифос проявляется в виде синих пятен на лимонно-желтом фоне. На обработку одной пластинки расходуют по 3—5 мл проявляющих реактивов. Величина i?/составляет 0,32.

2.6. Обработка результатов

Количество дифоса в анализируемой объеме определяют путем сравнения площади и интенсивности окраски пятна пробы и стандартных растворов препарата с использованием формулы:

X = — 1,25 •    мг/кг или мг/л, где

М К

X - количество препарата в исследуемом материале /мг/кг; мг/л/;

А - количество препарата, выявленное на пластинке /мкг/;

М- масса исследуемой пробы /г, мл/;

1,25 - поправка с учетом потерь пестицида в процессе анализа.

3. Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые при работе с химическими реактивами.

Настоящие методические указания составлены, по материалам Украинского ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии /Шуляк В. Д., Зайцева Л. Д., Малинин О. А. и Ярошенко В. И./.

Содержание

Временные методические указания по определению байгона методом

газожидкостной хроматографии в молоке............................................................3

Методические указания по определению дифоса (аббата) в продуктах животного происхождения методом тонкослойной хроматографии (дополнение к № 1350-75).................................................................................11

Методические указания по избирательному газохроматографическому определению хлорорганических пестицидов в биологических средах (моче, крови, жировой ткани и грудном женском молоке)......................................16

Методические указания по обнаружению, идентификации и определению содержания Т-2 токсина в пшцевых продуктах и продовольственном сырье...........................«............................................................................26

Унифицированная методика определения остаточных количеств фосфо-

рорганических пестицидов..................................................................................33

Сборник методических документов, необходимых для обеспечения применения Федерального закона от 12 июня 2008 г. № 88-ФЗ «Технический регламент на молоко и молочную продукцию»

Часть 13

Технический редактор Е. В. Ломанова

Подписано в печать 26.01.10 Формат 60x88/16    Печ.    л.    5,0

Тираж 200 экз.    Заказ    1

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18, стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован

отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора

117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел ./факс 952-50-89