ГОСУДАРСТВЕ ЛАМ КОМИССИЯ ПО ИШИЧЕОШ СРЕДСТВАМ ВОРЬВМ С ШЗДШВЯШ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ й (ГОРШКАМИ ПШ ЙСХ СССР

МЕТОДЫ

ап издал ш я вдеотшчЕств весящов

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ* КОРМАХ й ВНЕСШЕЙ СРЕДЕ

Ятт>Т

в в в, 19?! г,

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ

ас яшчесш средствам борьбу с

ВРЕДИТЕЛЯМИ.БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

Утверждено

Заиестителеу Главного cauuTapuoi-o врача Союза ССР

Д.Н.Лоранешш 1971 г.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ иИКРОКППИЧЕСТВ ПЕСТИЦДДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть У,

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкоуиссии по химический средствам борьбы с вредителями.болознями растений и оорнякауи при МСХ СССР

Москва 1971 г.

а)    пятно, соответствующее гексахлорану оудвт менее интенсивный, чей модельное пятно, содержащее 10 мкг укааан-ного препарата в пробе;

б)    пятно, соответствующее ДДТ будет слабее, чем модель, содержащая б мкг;

в)    пятно, соответствующее на модели алдрину будет отсут ствовать в исследуемой пробе.

Примечание: гаксахлорбенвод (самое верхнее пятно на хроматограмме) в кормах на нормируется

Чувствительность определения

Нузга - 0,05 мг/кг

Шрот необогащенвый липидами - 0,05 мг/кг Шрот, обогащенной яяыдами - 0,1 мг/кг

СОДЕРЖАНИЕ

Методические указания по разработке газо-хрома-тографичеоких методов анализа остаточных коли-чеотв пестицидов составлено Пивоваровым Г.А.

ХЛОРОРГАНИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Определение хлорорганических ядохимикатов салдрина,    II

гексахлорана, гептахлора, ДДТ, ДДД,ДДЭ и д_г.) в воде, овощах, фруктах и биологических средах методом газовой хроматографии- авторы: Гиренко Д.Б., Клисенко М.А.

Определение ДДТ, ДДЭ.ДДД, линдана и ТХМ-3 в молоке и    18

молочных продуктах методом газовой хроматографии авторы: Молочников В.В., Мочалов В.И., Моргунова А.П.

Колориметрический метод определения ДДТ в молоке и    23

молочных продуктах

авторы: Молочников В.В., Мочалов З.И.

Определение остаточных количеств гекоахлорбутадиена    27

в вине, соке и воде методом гаэо-кидкоотной хроматографии о использованием детектора по захвату электоронов авторы: Пивоваров Г.А*, Гар К.А., Алексеева Е»М«, Тимофеева 0,Н., Шварцман Г.А.

Спектрофотометрическое определение гекоахлорбутадиена    33

(ГХБД) в воздухе

авторы: Гулько А.Г., Драновокая Л.М.

Определение в растительных ыаолах ДДТ, Гамиа-1ХЦГ и    36

др. хлорорганических пестицидов авторы: Клиоенко М.А., Юркова З.Ф_М

Определение ДДТ,ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола    38

в хлопковых шротах, обогащонннх и иеобогагдинных липидами авторы: Белова А,Б., Новикова Л.В.

Определение ДДТ,ГПХ и у -ГХЦГ в почве, сахарной овекла и 47 картофеле методом тонкослойной хроматографии авторы: Косматый Е.С., Грицаенко Н*Н._в

Колориметрический экспресс-метод определения ДДТ в    49

корне- и клубнеплодах автор: Стеилковская ЛоАо

Определение полихлорпинена в воде* почве, картофеле    58

свекле, ее ботве, мясе в присутствии ДДТ и других ялорорганкческих пестицидов и лсшшслоркамфена в почве авторы: Клисепко М,А., Верблюдова Н.Й., Косматый «ѻ,

Грицианко НоИ.

Определение остатков Ш в растениях методом тонко-    68

одойной хроматографии

авторы: Косматый 2*0*, Полонская ФЛ!._# Тверская Б*Ы«.

Определение кельтана в огурцах методой тонкослойной    66

хроматографии

авторы: Фомичева Л*Г., Ефимова Л.И.

Определение эфирсульфоната в винограде, соке, воде    71

вине методом ТСХ

авторы: Голубев Т«Й₀, Владимирова Л*Г._С Колобродова Ю»И.

Фосфороргаяические соединения

Определение апрекса и каратана в растительных продуктах 74 н воде

авторы: Клисепко М*А*, Им и гида на А„М*

Определение бутифооа в продуктах промышленной лереоа-    80

ботки хлопка-сырца измена» хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

авторы: Талипов ШДа, Дзиянбаева Р.Х., Халимова У До,

Шейнина Р„И., Белобородова Н*Ф«

Полярографический метод определения метилнитрофооа    86

в растительной пробе и почве авторы: Патваыку Ф#И._# Сороковая ЛоВ*

З^ыашо-хроиатохтрафичеокий качественный s колоримотрмческиН 90 ноли явственный методы определения дояиашззрофооа в расти-яельяой пробе и почве автор: Иатраику ®д*

Определение трихлориетафооа-3 в молоке в молочных    &

продуктах с помощью тонкослойной хроматографии авторы: Молочников В.В., Серебренникова' В.А., Мочалов В,И.

Определение фоофамида, антио и карбофооа в воздухе    ЮЗ

методом газо-жидкоотной хроматографии авторы: Клиоенко М«А*, Гиренко Д.Б.

Определение сайфооа в воде, продуктах питания рао-    1°7

тительного происхождении, почве г. биологическом материале

авторы: Клисенко М*А«« Письменная М«В.

Определение оойфооа в воздухе методом хроматографии    П*

п тонкой слое

авторы: Клиоенко М.А,, Письменная М<В»

Определение остаточных количеств фталофооа и фона-    120

лона в_#растительном материале, почве и воде авторы: Новикова К.Ф», Мельцер Ф.Р»

Качественный и количоотвошшй методы определения    Г?.о

фозалона в яблоках» Яблоновых лйотш» почва и вода автор: Вндвпавняа Г.Ф»

ОпределеНИа фталофооа в молоке и мясе методом    133

тонкоовойной хроматографии

авторы: Заболотный К.Ф., Метелица в.К., Пспоклонои А.А.

Количественное колориметрическое опредоление хлорофооа    137

в молоке

автор: СтемпковокаН Л,А.

Определение емндофоов в молоке и *яое авторы: Непоклонов А. А.» Метелица В.К.

Определение байтокса в молоко и мной    jcjft

авторы: Ролз А.П., Непоклонов А.А,

;i9

Ьнаиматический агар-диффуаный метод о ирода ланий    156

фосфороргаанчеоких инсектицидов в продуктах пииотого происхождения авторы: Неиокдонов А.А., Метелица В.К.

Производные карбаматов

Колориметрический метод опредепааиа вупрацшш~1 _э    162

купрьцина-Н, Манеоа, Маркина» ХМТД в воадухе» продуктах питания растительного происхождения и биологических средах авторы: Клисонко М*А«, Векатейн Л.Ш„,

Экспрессное определенно тетраизтилтяураидиоуаьфада    164

(ТМТД) в зерне и зернопродуктах автор: Николаев А.В*

Определение остаточных количеств дикреаила в биодо-    16?

гических средах методом тонкослойной хромалографин автор: Сивохин И.А.

Прочие соединения

Определение 2-*мвтокси-3,6~дихлорбензойной кислоты    172

методом газо~кидкостной хроматографии авторы: Рыжков А*А., Гейд Ю.П,_В Бабин Е.П., Свнри • денко А»С«» Чекавская Л,А.

Количественное определение дикеибы (дианаха,    179

беявеиа~Л) в растениях и в почве методой хроматографии в тонком слое

авторы: Березовский Ч.Я., Самоовах Л.С., Никотин В.В.

Определение диурона, ллнурона, монуронв, проланида,    184

солана, фалорана в воде, почве, овощах методом хрома -тографяи в тонком слое евтор: Оаыосват I.C.

Колориметрический метод определения которая* (пахтаройa)    JH8

в хлопковом масле

аяторц: Новикова К.Ф., Меивцер Ф.Р., Алдомнкч Т*В.

Качественное я количественное определение каптала и    193

фталаиа в лине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, в почве и воде авторы: Вайптрауб Ф.П., Дронь Л,Л,

Определение мельпрокса в воздухе    199

авторы: Сорокина Л.В*, Клнсопго М.А.

Определение прометриня в почве, воде и растительном    203

материале методом хроматографии в тонком слое автор: Дроздова О-А.

Определение фенаэона в свекле, почве и воде    207

авторы: Эгерт В.9., Лиелгалве А.А.

Определение хлората иагиня в препарате-дефолианте,    2.ТЗ

хлопковом масле, ироте, жмыхе, османах, ядрах оемян и волокне хлопчатнике

авторы: Талипов II). Т., "жиппбяова Р.Х., Халимова УЛ*₉ Белобородова Н.Ф.

Белое кристаллическое вещество. Температура плавлении 109,4-П0°С. Без запаха* хорошо растворим в органических растворителях. Менее токсичен, чем ДДТ.

Технический ГХЦГ - кристаллический, маслянистый на ощупь продукт, обладающий характерным запахом плесени.

Хорошо растворим в органических растворителях.

Известно 8 изомеров гексахлорциклогексана (альфа, бета, гамма, дельта). Токсичным начале : препарата является гамма изомер, температура плавлония П2°С, летучесть - 9,8* ЛГ⁵мг/л . при 20°С и 760 мм рт.ст.

Альдрин

(1,2,8,4,10,10 - гептахлор - 1,4,4а,5,8,8а - гекса-индо 1,4 - ЭНД0ЭК80 - 5,8, - дииетанонафталин)

Мол.вес 864,94

- 39-

Белое кристаллическое вещество, почти без запаха* Температура плавления I04-104,5°С* Хорошо растворим в органических растворителях. Технический препарат - воскообразное вещество.

Белое кристаллическое цество, температура плавления 226°С давление пара при 20°С 1,089*10'^ мм рт.ст.

Практически нерастворим в воде, хорошо растворим в бензоле, хлорбензоле, спирте и других органических растворителях.

Принцип метода*)

Метод основан на извлечении ядохимикатов из исследуемой пробы с помощью н-гексана, очистке экстракта на колонке с окисью алюминия и последующем хроматографировании в тонком олое окиси алюминия.

Подвижным растворителем служит н-гекоан. Пятна определяемых препаратов обнаруживают после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра в ацетоне о добавлением пергидроля и последующим облучением ультрафиолетовым светом. Количественное определение производят путем визуального сравнения полученных пятен с пятнами из стандартных растворов, вносимых в экстракт из минимальной навески исследуемого шрота, в которой ядохимикаты не обнаруживаются.

Модельный экстракт и исследуемые пробы подвергаются очистке на колонке в идентичных условиях. Это позволяет

- 40*

приблизить ftf' чистых ядохимикатов в модельном экстракте и ядохимикатов, извлекаемых из исследуемого шрота, а также избежать ошибки определения, связанной с частичной потерей ядохимикатов при очистке.»

Реактивы и растворы

Н-гексан или петролейннй эфир с температурой кипения 40-70°С.

Диэтиловый эфир

Ацетон х.ч.

Смесь диэтилового эфира с гексаном - 15:86

Натрий сернокислый безводный х.ч.

Насыщенный раствор безводного сернокислого натрия в серной кислоте уд.вес 1,84 (100 г безводного сернокислого натрия растворяют в од ом литре серной кислоты).

Окись алюминия для хроматографии 2 степени активности, просеянная последовательно через сита в 100 мет (размер отверстий 0,147 мм) и 150 ыеш (размер отверстий 0,104 мм)„

Для работы используют фракцию, остающуюся не. сите в 150 меш.

Кальций сернокислый (CaJb^HgO) чда. Просушивают в сушильном шкафу при температуре 180°С в течение 48 часов.

Хранят в банке с притертой пробкой.

Спирт этиловый

Стекля* ная вата, очищопная концентрированной серной кислотой и промытая дистиллированной водой, высушенная.

Проявляющий реактив. Готовят в день употребления. На пластинку размером 9x12 см расходуется 8-10 мл раствора.

0,1 г свекеперекристаллизованного аэотнокислого серебра растворяют в 2 мл аммиака уд,вес 0,9 и доводят объем до 50 мл ацетоном. Затем добавляют 0,1 мл 30# пергидроля.

Для заполнения колонок. Окись алюминия для хроматографии II степени активности, просеянная черев сита в 100-150 меш., пропитанная концентрированной серной кислотой в количестве I объем эрной кислоты на 2 весовых части окиси алюминия,

В ступке окиоь алюминия заливают кислотой и тщательно перемешивают. Полученную массу в виде комочков вносят в ко-лонку через воронку, заливают гексаном, почти не утрамбовывая.

Стандартный раствор неотицидов 1000 ыкг/ми (10 иг ДДТ, и такое ае количество алдрина, ГХЦГ и гекоахлорбензола (все вмостс) растворяют в 10 мл гексана. Хранят в холодильнике в плотно закрытой оклянке. Перед употреблением делают необходимое разведение до содержания 5 мкг в 10 мкл.

Приборы и посуда

Пластинки для хроматографии. Стеклянную пластинку размером 9x12 или 10x20 см тщательно промытую содой, хромовой смесью, дистиллированной водой и выоушевную, протирают этиловым спиртом и покрывают сорбционной массой. Сорбционная маоса из окиси алюминия готовитоя следующим образом: 50 г окиси алюминия, просеянной через сита Г00-150 меш., смешивают в фарфоровой отупке с 5 г сернокислого кальция, переносят в колбу, прибавляют 75 мл дистиллированной воды и встряхивают до образования однородной массы. 10 г сорбционной массы напивают на пластинку и, покачивай, равномерно распределяют по всей поверхности. Сушат пластинки при комнатной температуре 24 часа, затем при П0°С 25 минут, либо сушат на воздухе 20 минут и при П0°С - 45 минут. Хранят пластинки в зксикаторе, а перед употреблением обязательно актчпирутт в течение б минут при П0°С,

Делительные воронки на 100, 250, 500 ил

Колбы с притертыми пробками на 100 и 250 мп

Прибор для отгонки растворителей

Колбы круглодонные на 50, 100 мл

Шкафы аушильные

Термометры контактные

Реле

Микрошлрицы на 10 мкл (0,01 мл) для нанесения стандартных растворов.

Стеклянные капилляры для нанесепип проб или иикропипет-ки на 0,1 мл.

Термостат

Пульверизаторы стеклянные для опрыскивания пластинок

Камера для хроматографирования - стеклянный сосуд с притертой крышкой. Можно использовать эксикатор.

Камера для опрыскивания

Бани водяные

Прибор для встряхивания

Ртутно-кварцевая лампа ПРК-4

Пробирки с пришлифованными пробками емкостью I мл с отводами на 0,1 мл.

Стеклянные хроматографические колонки: диаметр 16 мм, длина 150 мм.

Приготовление колонки

Колонку сначала заполняют на I см стеклянной ватой, имеющей волокна 1-2 см. После ввесения слоя черев него пропускают небольшое количество смеси этилового эфира с гексаном. 8атем колонку заполняют на 2,5 см окисью алюминия и также промывают смесью диэтилового эфира с гексаном. После этого колонку заполняют еще на 2,5 см окисью алюминия, пропитанной серной кислотой.

-//3“

Опиоание определения

Экстракция препарата И8 пробы и очистка экстрактов

Навеску шрота (обогащенного 10 г, необогащенаого 20 г) или лузги (20 г) делят на две равные части, помещают в колбы на 100-260 ил с притертыми пробками. Заливают пробы гексаном в количестве 8 объема гексана на одну весовую часть аналивируемой пробы и встряхивают на аппарате для встряхивания 80 минут. Экстракт фильтруют череэ воронку Бюхнера, не перенося пробу на воронку. В ту же колбу заливают повторно такое же количество гексана, встряхивают еще 30 минут, фильтруют, количественно перенося пробу на воронку Бюхнера с помощью 80 мл гексана (8 раза по 10 мл). Полученный экстракт упаривают до объема около 30 мл и пропускают череэ колонку оо скоростью 2 мл/мин. Промывают колбу и колонку 50 мл смеси диэтилового эфига о гексаном. Эту операцию необходимо проводить непрерывно, не оставляя на другой день. Очищенный экстракт полученный с 2-х параллельных колонок объединяют и упаривают до I мл на установке для отгонки растворителей. Затем количественно переносят в пробирку ем--костью около I мл и осторожно выпаривают при температуре 50°С до конечного объема приблизительно 0,2-0,3 мл. Пробирку помещают на 15-20 минут в морозильную камеру холодильника, декантируют дванды небольшим количеством охлажденного гексана и эагем упаривают гексан почти досуха (конечный объем 2-3 капли).

Параллельно с исследуемой пробой готовят 2 модельных экстракта каждый из которых получен из I г того не шрота (луэги 2 г).

Примечание: при анализе гранулированного шрота его необходимо размельчить.

Перед очисткой на колонке в модельные экстракты вносят определяемые ядохимикаты в количестве 10 мкг и 5 нот (по 10 пня модельных растворов). Дальнейший ход анализа аналогичен описанному для исследуемой пробы.

Хроматографирование

Упаренные экстракты (исследуемые и модельные) с помощью капилляра количественно наносят на пластинку на расстоянии 2 см от края, трижды обмывая пробирку 2-3 каплями гексана. Нанесение производят в одну точку так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см.

Пластинку с нанесенными растворами помещают в термостатированную при 22°0 камеру для хроматографирования, на дно которой налит н-гек ан, ва 30 минут до начала хроматографирования. Край пластинки с нанесенными растворами может быть погружен в подвижный растворитель не более, чем на 0,5 см.

После того, как фронт растворителя поднимется па 10 см, пластинку вынимают из камеры и помещают в сушильный шкаф на 5 минут при температуре 30°С. Далее пластинку опрыскивают проявляющимся раствором, и облучают у.ф. светом в течение 10-15 минут. Пластинки следует располагать на расстоянии 20 см от источника света. При наличии хлорорганичеоки: пестицидов на пластинке появляются пятна серо-черного цвета.

Обработка данных анализа

При обнаружении пятен ядохимикатов в исследуемой пробе испытуемый шрот (лузга) бракуется для использования в рационах лактируюших животных и яйценоских птиц¹).

Для определения возможности использования шрота (лузги) в рационах откормочных животных пятна, полученные при анализе исследуемого образца сравнивают с пятнами стандартных растворов. При этом учитывают что на моделях ядохимикаты располаг ается в следующем порядке от линии старта:

-ГХЦГ, 4*4* ДДТ (основное пятно), 2,4 ДДТ, алдрин и гексахлорбензол.

Шрот (лузга) считается пригодным для использования в рационе откормочных животных и птиц в том случае, если:

1

Временные предельно допустимые остаточные количества песгицлдов в кормах для сельскохозяйственных животных от 5 ноября 1967 г.