ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ
ЧАСТЬ ХЕ-я
Москва - 1983
ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР
МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
ЧАСТЬ ХШ
Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками
при МСХ СССР
Москва-1983
Таблхпл > I
Метрологическая характеристика ГТХ метода количественного определения гера-илбутирата в объектах |
Анализируемый
объект |
Экстрагент |
Задано
мг/кг |
Число
повтор
ностей |
Обнаружено в % |
5
г |
«Sum.
7. |
(СгдС)% |
к |
2 |
3 |
4 |
5 |
б |
7 |
8 |
почва |
дкзтидовыЯ
эфир |
0,041 |
4 |
80,5
102,0
84,9
100,0 |
10,75 |
11,70 |
91,9*17,1 |
хлористый
метилен |
0,041 |
4 |
74,9
67,7
00,5
77.6 |
5,48 |
7,29 |
75,2*8,7 |
дкэтндовыЯ
эфир |
0,2054 |
4 |
94,С 90,2 93,8 98.0 |
3,20 |
3.41 |
94,0*5,1 |
хлористый метилон |
0.2054 |
4 |
85,9
82,2
74,5
£0.5 |
4,75 |
5,88 |
80,8*7,6 |
|
Продолжение таблицы i |
|
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
г*
/ |
8 |
вода |
хлоэиотыЯ
метилен |
1.027х.0“* |
е |
33,7
95.0
96.3 100,1
99.0
93.3 |
3,77 |
3,91 |
96,4 ♦ 3,9 |
2,С5х10“3 |
4 |
94.0 89,6
51.0 92,5 |
1,94 |
2,12 |
91,7 г 3,1 |
i.oaxicr3 |
4 |
94.0 39,5
94.0 9..0 |
2..6 |
2,34 |
82,1 , 3,4 |
корнеплоду с ах. -оеьгк |
ди^ткловий |
0,4103 |
4
_ |
95,0
93.7
97.7
93.8 |
:.т? |
1,81 |
9-;,6 * 2,8 |
|
Продолжение таблицы I |
А |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
юрке-as оды сах. свеклы |
диэтиловкЯ
эфир |
0,1027 |
4 |
92,0
93,6
100,0
94.5 |
3,68 |
3,82 |
96,3 ♦ 5,9 |
0,041 |
4 |
100,0
92,8
100,0
06,4 |
3,45 |
3,55 |
97,3 ^ 5,5 |
0.C2I |
4 |
83,8
88.4
83.4
88.4 |
2,о2 |
2,66 |
87,3 ♦ 3,7 |
хлористый
метилен |
0,041 |
4 |
91,* 30,4 е9;3 91, £ |
5,11 |
5,8i |
88,0 г 8,2 |
|
Продолжение таблицы-1 |
- |
2 |
3 |
* |
5 |
6 |
7 |
3 |
|
|
|
|
34,7 |
|
|
|
|
|
|
|
39,3 |
|
|
|
|
|
1,027 |
е
f |
34,0 |
3,2. |
з.еа |
87,1 , 5,* |
|
|
|
|
39,8 |
|
|
|
ЛИСТЬЯ |
хло^кспЛ |
|
|
91,0 |
|
|
|
с ах. . |
металем |
|
|
93,5 |
|
|
|
• |
|
0,5.4 |
4 |
82,2 |
5,53 |
6,53 |
37,5 * 8,9 |
1 |
|
|
|
83,2 |
|
|
|
|
|
|
|
9:.8 |
|
|
|
|
|
|
|
89,3 |
|
|
|
|
|
0,254 |
4 |
94,0 |
4,61 |
5,15 |
39,6 ^ 7,6 |
|
|
|
|
83,3 |
|
|
|
|
Й
VA |
-259-
ССДБРЖАНИЕ
Стр,
I
12
23
29
36
46
54 * 61
ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ
I.Временные методические указания указания по
определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.
2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*
3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и
яблоках методом ТСХ.
ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ
1. Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.
2, Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.
3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,
4. Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности
и биосредах методом ТСХ.
5. Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,
260-
6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ. 67
7. Временные методические указания по определению о<$у-
нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов. 76
8. Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами
ГКХ и ТСХ. 82
9. Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ
и ГЖХ. 91
10. временны» методические указания по определению хлоро
фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной. 90
11. Методические указания по определению в зерне и про
дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами. 105
АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]
1. Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.
и растительном материале хроматографическими методами. цу
2. Временные методические указания по определению байгой*
методом ГЗКХ в молоке. 138
3. Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.
Настоящие методические указания предназначены для
санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарныхвагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.
-4 95-
"УТВШВД/Ш" Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР А.И.Зайченко и ао " октября 1931г. № 2W-6I
ВРЕМЕННЫЕ ШВДИЧЬШЮ УКАЗАНИЯ НО 011РЬДО1ЕНИЮ ГКРАНИЛВУТИРАТА МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ПОЧВВ,ВПДЕ.КОРПЕНЛОДАХ и
листьях сахарной евши
I.Краткая характеристике препарата.
Геранилбутират; геранилопый эфир масляной кислоты; 3,7-диметил--СЕ)-2,6-октадионол-1-бутаноат:
СН3-С*СН-^:Н2-С112^С*=СН-СН2-Ю-^-СН2-СН2-С113; cX4^ai°2*
сн3 Ы3 о
бесцветная маслянистая жидкость с “.веточным запахом; температура кипения 142-а43°С/13 мм рт.ст.показатель преломления Я^а1,4560; удельный вес 0,9006; температура вспышки ЛСсС;растворим в органических растворителях - метиленхлориде,гексане.спирте,хлороформе, ксилоле,толуоле,ацетоне,нерастворим в воде;стабилен при хранении в герметически закрытой таро при 4-iO°C.
Препарат не фитотоксичен и малотоксичен для теплокровных животных: Л/Uq ПРИ °Ральном введении для белых мышей 3900-4100 мг/кг* Рекомендуется использовать в качестве полового аттрактанта для борьбь с жуком щелкуном степным.
-J 96-
2.Методика определения геранилбутирата методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии в почве, воде, корнеплодах и листьях
сахарной свеклы.
2.1.Основные положения.
2.1Л.Принцип метода.
Метод основан на извлечении геранилбутирата органическим растворителем,очистке экстрактов методом препаративной хроматографии на кремневой кислоте,количественном определении методом газожидкостной хроматографии с пламенно-ионизационным детектором на неподвижных фазах 5Е-30 и ХЕ-60.
2.1.2.Метрологическая характеристика методов ГЖХ и ТСХ.
Диапазон определяем;.* концентраций 0,001 - 1,0 мг/кг.
Пределы обнаружения 0,004 мкг (ГЖХ) и 1,0 мкг (ТСХ).
Пределы обнаружения в почве 0,04 мг/кг(ГЖХ);0,02 мг/кг(ТСХ);
в воде 0,001 мг/л (ПКХ и ТСХ); в корнеплодах свеклы 0,02 мг/кг (ГЖХ) и 0,04 мг/кг(ТСХ); в листьях свеклы 0,25 мг/кг (ГДХ и ТСХ). Средние значения определения,стандартные отклонения,доверительные интервалы приведены в таблице 1.
2.1.3.Избирательное' ь метода в присутствии пестицидов,близких по химическому строению и области применения.
Определению геранилбутирата не мешают фосфорорганические пестициды ( метафос.рогор.метатион.цианокс.фозалон^лсан),обычно применяемые для борьбы с щелкунами.
-4 77 -
2.2.Реактивы и материалы.
Н-гексан,ч.,ТУ -6-09-3375-78.
Хлористый метилен,ч.,ТУ-6-09-3716-74.
Диэтиловый эфир,медицинский.
Этиленгликоль,ч.,ГОСТ 10164-75.
Фосфорно-молибденовая кислота,хч,МРТУ 6-09-4790-67.
Иод кристаллический,ч.ГОСТ 4159-79.
Неподвижные фазы для ГЖХ S Е-30 или ХК-60.
Хроматом N-AW-DMCS (0,16-0,20мм) или N-AW-HMDC (0,16-0,20мм). Сульфат магния,хч, ГОСТ 4523-77.
Кислота кремневая водная,ГОСТ 4214-78.
Окись магния,ГОСТ 4526-75.
Азот газообразный.
Водород газообразный.
Стандартные растворы гер&нилбутирата в гексане различных концентраций (1,5,10,100,1000 мкг/мл).
2.3.Приборы,аппаратура и посуда.
Хроматограф серии "Цвет",снабжённый пламенно-ионизационным детектором.
Ротационный вакуумный испаритель любого типа.
Водоструйный насос.
Аппарат для встряхивания колб с пробами любого типа.
Колбы конические на 250 мл,ГОСТ 10394-72.
Колбы круглодонныо на 500,250 100 и 50 мл,ГОСТ 10394-72. Во.юнка делительная на 1,5-2 л,ГОСТ 6613-75.
Воронки химические,ГОСТ 8613-64.
Пи ютки на 1-10 ил,ГОСТ 20292-74 МикропипеТки на 0,1-0,2 мл.ГССТ 1770-74.
-198-
Стеклянныв пластины для ТСХ размером 8x16 см.
Пульверизатор стеклянный любого типа.
Сосуды для ТСХ объемом но менее 1л с крышками.
Сосуды для препаративной хроматографии ( кристаллизаторы с крышками) Эксикатор для обработки пластин парами иода.
Стеклянные колонки для хроматографа длиной 2м.
Микрсшприц емкостью 10 мкл,ЫШ ТУ 5Е 2.833,024.
2.4.Отбор проб и подготовка к опроделению.
2.4.1.Отбор проб.
Отбор проб производят в соответствии с унифицированными правилами отбора сельскохозяйственной продукции,пищевых продуктов и объектов окружающей среды,утверждённых заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.8.1979,# 2051-79.
Для анализа используют средние пробы : измельчённой и просевной почвы массой 50г,воды - объемом I л,измельчённых корнеплодов сахарной свеклы - массой 50г,измельчённых листьев - массой Юг.
2.4.2.Приготовление пластин для анализа методом ТСХ:
I г окиси магния (размер зерна 0,10 мм) смешивают с 0,1 г гипса, добавляют 3,7 мл дистиллированной воды,полученную смесь равномерно наносят на стеклянную пластину размером 8x16 см.После испарения воды пластину выдерживают 30 минут при 120°С.
2.5. Про веде кие определения.
2,5.1.Экстракция,очистка экстракта.
Почва. Пробу почвы массой 50 г трижды экстрагируют при встряхива-шш хлористым метиленом ( или диэтилоеым эфиром) порциями по 80, 50,50 мл в течение 40,10 и б минут соответственно.Объединённый экстракт сушат безводным сульфатом магния,добавляют 0,1 ил этиленгликоля и упаривают на ротационном вакуумном испарителе (температур
-[ 99-
бани не выше 25°С) до 1-2 мл.Остаток количественно переносят на пластину с незакреплённым слоем кремневой кислоты (толщина слоя 2 мм,размер эорна 0,10 мм) и элюируют гексаном.Затем соответствующую зону ( после сопоставления со стандартом,который обнаруживают при обработке парами иода) переносят на фильтр Шотта и промывают 20 мл диэтилового эфира. Эфир упаривают до суха, добавляют необходимое количество гексана ( для ПКХ определения не менее 1 мл) и анализируют полученный рас гвор.Нижний предел обнаружение методом ПКХ 2 мкг в пробе или 0,04 мг/кг.
Для качественного анализа метод' м ТСХ на пластину с окисью магния наносят очищенный экстракт ( полностью при малых дозах геранил-бутирата, или его аликвотную часть при больших) и элюируют гексаном.После проветривания пластину опрыскивают 10£н ным спиртовым раствором фосфорно-молибденовой кислоты и нагревают при 120°С до появления пятен (*.0-15 минут).Нижний предел обнаружения I мкг в пробе или 0,02 мг/кг. геранилбутирата 0,32-0,33.
Рода.
Пробу воды объемом : л помещают в делительную воронку и дважды экстрагируют хлористым метиленом порциями по 80 кит (2 и X мин.), Органический слой отделяют,сушат безводным сульфатом магния,добавляют 0,1 мл этиленгликоля и упаривают на ротационном испарителе до 1-2 мл.Остаток очищают методом препаративной хроматографии на кремневой кислоте как описено выше.Конечный объем дпя анализа методом ПКХ не менее 0,5 мл; нижний предел обнаружения геранилбути-рата I мкг в пробе или 0,00i мг/л.Анализ методом ТСХ проводит на окиси магния,пробу наносят полностью (при малых дозах) или её аликвотную часть; нижний предел обнаружения 1 мкг в пробе или С, 001 мг/л.
-юо-
Корнеплоды сахарной свеклы.
Пробу измельчёньых корнеплодов сахарной свеклы массой ЬО г экстрагируют дважды при встряхивании диэтиловым эфиром или хлористым метиленом ( по 80 мл в течение 30 и 15 минут).Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом магния.упаривают и очищают как описано выше.Конечный объем раствора для ГЖХ определения не менее 0,5 мл; нижний предел обнаружения 1 мкг в пробе или 0,02 мг/кг.Для качественного анализа методом ТСХ на пластину наносят аликвотную часть раствора ( соответствующую 25 г корнеплодов - при малых дозах, и менее),нижний предел обнаружения 1 мкг в 25 г или 0,04 мг/кг.
Листья сахарной свеклы.
Пробу измельчённых листьев массой 10 г дважды экстрагируют при встряхивании хлористым метиленом ( порциями по 40 и 30 мл в течение 30 и 15 минут соответственно),затем промывают листья ещё 20 мл растворителя.Объединенный экстракт сушат,упаривают и очищают как описано выше.Коночный объем раствора для НОС определения не менее i мл; нижний предел обнаружения 2,5 мкг в пробе или 0,25 мг/кг.
Для качественного анализа методом ТСХ на пластину пробу накосят полностью ( при малых дозах) или её аликвотную часть,нижний предел обнаружения 2,5 мкг в пробе или 0,25 мг/кг.
2.5.2.Уеловия хроматографирования.
1) стеклянная колонка (2м х Змм).заполненная хроматоном M-/\W-HM0C (О,*6-0,20 к) с Ь% SK-30, СКОЛОНКИ=:90°С; t испа?ктел„=220°С; расходы гаьов : азота - 33,водорода - 30,воздуха - 300 мл/мин; при чувствительности шкеты электрометра 2 х 10~А А минимально определяемое количество геранилбутирата 0,04 мкг,линейная зависимость высоты хроматографического пика от концентрации соблюдается в интервале о* 0 до 10 мкг/мл.
-2CI-
2) стеклянная колонка (2м х 3 мм).заполненная хроматоном N-AW-DMCS (0,16-0,20 мм) с ЬХ ХЕ-60, tKOJIOHKJ)=155°C, t испаритмя-<вО°С5 расходы газов: азота -33.водорода - 28,воздуха -300 мл/мин;при чувствительности шкалы электрометра 2 х 1(Г**А минимально определяемое количество геранилбутирата 0,04 мкг;линейная зависимость высоты хроматографического пика от концентрации соблюдается в интервале от 0 до 20 мкг/мл.
2.6.Обработка результатов.
Содержание геранилбутирата в пробе при определении методом ТСХ ( X мг/кг) рассчитывают по формуле
х -~jr • г*е
А - содержание геранилбутирата в пробе,найденное по сравнению со стандартом (мкг),
Р - масса пробы,взятой для анализа (г),
X - содержание геранилбутирата в пробе.
Содержание геранилбутирата в пробе при определении методом ГЖХ рассчитывают по форцуле:
AV,\-VIGOO Х " 4-А.-Р >г*е
А - содержание геранилбутирата в стандарте,мкг/мл,
V, «- объем стандарта, введенного в колонку газового хроматографа,мкл;
объем анализируемой пробы,введенной в колонку хроматографа,№кл; А,- высота пика стандарта,мм;
высота пика анализируемой пробы.мм;
V -обций объем анализируемой пробы,мл;
Р - нлгоска.г.
2.7, .ребо’шния техники, безопасности
* процессе работы по дайте! методическим указаниям нужно придержи-ля’М.см правки тсхп:-м: безопасности,рекомендованных при работе с » ьинес.лши .и'цеотвими*
5. Иотодяческчо указания подготовлены: Албуи И,А. ВШЦШЭР I. * КйГ Г j в