Утверждено 31.07.1973
Хроматографическое (ТСХ) и колориметрическое определение катана и фталана в вине, виноградном соке, листьях и ягодах винограда, яблоках, почве и воде
Кал тан (ванцид, мелипур, ортоцид-406) - N- (трихлорметилтио)-циклогексен-4-дикарбоксимид-1,2. Фталан (фалтан, фолпст, тио-фал) -Ы-(трихлорметилтиофталимид). Оба препарата - кристаллические вещества, не растворяются в воде, хорошо растворяются в бензоле, ацетоне, этиловом спирте, диэтиловом эфире, хлороформе. Относительная молекулярная масса первого препарата 300,61, второго 296,55.
Принцип метода. Метод1 основан на извлечении препаратов бензолом, очистке экстрактов от примесей и хроматографическом или колориметрическом определении пестицидов. Определяемый минимум тонкослойной хроматографией (ТСХ) 0,005 мг/л вина, сока или воды, 0,03 мг/кг яблок, ягод винограда или почвы, 0,05—0,10 мг/кг листьев. Чувствительность колориметрического метода 0,05 мг/л воды, вина или сока, 0,05 мг/кг яблок, ягод винограда или почвы, 0,15—0,20 мг/кг листьев.
Реактивы и растворы
Бензол х. ч.
Диэтиловый эфир (медицинский для наркоза).
Натрий сернокислый безводный х. ч.
Окись кремния для люминофоров.
Гипс медицинский.
Резорцин свежесублимированный.
Кислота уксусная ледяная х. ч.
Стандартные растворы каптана и фталана в бензоле (100 мкг/мл). Уголь активированный КАД-молотый.
Хромогенный реактив. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 2,5 мл дистиллированной воды, приливают 1,5 мл 25 %-ного аммиака и доводят ацетоном до 50 мл. Реактив сохраняют в темной склянке не более семи дней.
Приборы и посуда
Делительные воронки вместимостью 0,5 л.
Колбы конические на 0,5—0,7 л.
Колбы круглодонные на 0,3—0,5 л.
Пробирки химические 20 х 200 мм.
Аппарат для встряхивания.
Воронки химические.
Прибор для микросублимации (см. рис. 10)
Пластинки стеклянные 8x16 см.
Камера хроматографическая.
Источник ультрафиолетового излучения.
Баня глицериновая.
Баня водяная.
Центрифуга.
Цилиндры мерные со шлифом.
Фотоколориметр ФЭК-56.
8
Приготовление пластинок
1 г окиси кремния, 0,1 г гипса и 4,5 мл дистиллированной воды встряхивают 1 мин, смесь выливают на пластинку. Пластинки оставляют при комнатной температуре на 30 мин, затем активируют 30 мин при 75—80 °С. Хранят пластинки в эксикаторе над слоем силикагеля.
Ход анализа. Вино, виноградный сок, вода (речная, колодезная). 100 мл пробы встряхивают в делительной воронке с 25—30 мл бензола 5 мин. Образующуюся эмульсию разрушают добавлением нескольких капель метанола или центрифугированием 3—5 мин при 7000 об/мин. Бензольный экстракт фильтруют в колбу через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют на водяной бане до 0,5—1,0 мл. Следы растворителя удаляют током воздуха. Сухой остаток растворяют в диэтил о-вом эфире. Эфирный раствор используют для качественного и количественного определения.
Листья и ягоды винограда, яблоки, почва. 20 г измельченных листьев, 100 г ягод винограда или нарезанных дольками яблок, 100 г почвы экстрагируют 1 ч бензолом на аппарате для встряхивания. Отношение массы пробы к объему растворителя должно быть не менее 1 :2. Экстракты фильтруют через слой безводного сернокислого натрия и упаривают до объема 0,5—1 мл. Растворитель удаляют досуха, остаток растворяют в диэтиловом эфире. Эфирный раствор переносят количественно в патрон прибора для вакуумной дистилляции. Дистилляцию проводят 30 мин при 125—130 °С (глицериновая баня) и вакууме не менее 2— 3 мм рт. ст. Дистиллированные препараты смывают с «пальца» диэтило-вым эфиром.
Для колориметрического определения препаратов, кроме вакуумной дистилляции, необходима еще дополнительная очистка. Для этого смыв с холодного «пальца» встряхивают 30 с с активированным углем КАД-молотый (1 г). Раствор фильтруют через плотный бумажный фильтр.
Хроматографическое определение. Экстракт концентрируют до объема 0,3—0,5 мл и наносят на пластинку. Рядом наносят экстракт контрольной пробы и стандартные растворы препаратов. Подвижным растворителем служит бензол. После хроматографирования пластинку тщательно проветривают до полного испарения растворителя и опрыскивают проявляющим реактивом. Через 10 мин пластинку подвергают ультрафиолетовому облучению. Ртутно-кварцевую лампу необходимо включать за 10—15 мин до облучения пластинок. Через 1—2 мин после облучения на хроматограмме появляются темно-коричневые пятна. Ве-
9
личина Rf каптана 0,30—0,35, фталана 0,55. Незначительное количество коэкстрактивных веществ пестицидов не мешает.
Колориметрическое определение. Очищенный экстракт упаривают до небольшого объема и количественно переносят в жаростойкую пробирку. Добавляют 0,5 г резорцина и выдерживают пробирку на глицериновой бане 20 мин при 135—138° С. Пробирки вынимают поочередно и сразу же, пока резорцин находится в расплавленном состоянии, приливают 15—20 мл ледяной уксусной кислоты. Содержимое пробирки переносят в мерный цилиндр, объем доводят до 25 мл. Окрашенный раствор колоримстрируют через 5—10 мин в кювете с толщиной слоя 5 см при синем светофильтре (428 нм). Раствором сравнения служит ледяная уксусная кислота. Параллельно измеряют оптическую плотность контрольной пробы, которая не должна превышать 0,01—0,03.
Содержание препарата в пробе находят по калибровочному графику. Ледяную уксусную кислоту можно заменить абсолютным этиловым спиртом. Для этого его кипятят I ч с негашеной известью в колбе с обратным холодильником, а затем отгоняют.
Для построения калибровочного графика в пробирки вносят 0, 0,05, 0,1, 0,2...1,0 мл стандартного раствора препарата и 0,5 г резорцина. Пробирки выдерживают на глицериновой бане при 135—138 °С. Далее поступают так, как описано для проб.
Расчет. Содержание пестицидов в пробе вычисляют по формуле:
X- содержание пестицида в исследуемом объекте, мг/кг или мг/л;
А - количество препарата, найденное в пробе на хроматограмме путем сравнения со стандартами или по калибровочному графику, мкг;
Р - масса или объем исследуемой пробы, г или мл.
10
1
Ф. П. Вайнтрауб, Л. Г1. Дронь (ВНИИ биологических методов защиты растений).
7
