"Утверждено” Министерством здравоохранения СССР
”29" июля 1991 г.
N 6261-91
Методические указания по определению имазамстабенз-метила в воде, почве, растительных объектах газожидкостной хроматографией.
I. Характеристика препарата.
Химическое название: Имазаметабенз-метил.
Смесь изомеров: метил -6- (4-изопролил-4-метил-5-оксо-2-имидазолин-2-ил)-m-толуат; метил -6- (4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-имидазолин-2-ил) -р-толуат (смесь изомеров). Торговое название Ассерт, ф. Цианамид, США. Структурная формула:
Эмпирическая формула:С|бН20^Оз
Молекулярная масса 288,35.
Соотношение изомеров: р:м * 63:37 (не более) р:м = 56:44 (не менее).
Рекомендован для применения на зерновых культурах.
2. Методика определения имазаметабенз-метила в воде, почве, растительных объектах газожидкостной хроматографией.
2.1. Основные положения.
2.1.1. Принцип метода.
Метод основан на экстракции пестицида из анализируемых проб 1%-ным раствором соляной кислоты в смеси органических растворителей (ацетон+мета-нол = 1:1), очистке экстракта н-гексаном, перераспределении пестицида из ацетоно-метанольной среды в хлороформ при рН=3,5 и дальнейшем определении препарата методом газо-жидкостной хроматографии с использованием детектора по захвату электронов.
Разработчики: Н.И.Киселева, Н.П.Пархомчук, С.И.Гнед (УкрНИИГИН ТОКС, г. Киев)
2.1.2. Метрологическая характеристика метода.
Число параллельных определений - 5.
Размах варьирования:
-вода - 85,0-93,0 %
-почва - 76,0-89,0 %
- растения - 73,0-85,0%
Среднее значение определения:
- вода - 88,4%
- почва - 81,8%
- растения - 77,8%
Стандартное отклонение:
- вода - 0,343
- почва - 0,549
- растения - 0,569
Относительное стандартное отклонение:
- вода - 3,8
- почва - 6,7
- растения - 7,3
Доверительный интервал среднего при п=5, Р=0.95:
- вода - 88,4± 1,5%
- почва - 81,8± 6,6%
- растения - 77,8± 6,8%
Предел обнаружения - 0,01 мг/кг (почва, растения); - 0,005 мг/л (вода).
2.2. Реактивы и растворы.
Ацетон, ос.ч., ТУ 6-09-3513-86. н-гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Имазаметабенз, ан.стандарт, фирма Цианамид.
Метиловый спирт, х.ч.
Натрий хлористый, насыщенный водный раствор.
Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76, промытый ацетоном и н-гексаном.
Соляная кислота, 1%-ный водный раствор и 0,5 М раствор.
Гидроокись натрия, 5 М р-р.
Хлороформ, ГОСТ 20013-74.
Газ-носитель - азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
Стандартный раствор имазаметабенз-метила в ацетоне - 0,5 мкг/мл.
Смесь для экстракции: 1 %-ная хлористоводородная кислота в смеси ацетона и метанола (1:1) : к 1л метанола прибавляют 1 л ацетона и 20 мл концентрированной НС1 и смешивают.
2.3. Посуда и оборудование.
Воронки химические фильтровальные, ГОСТ 8613-75, d=90 мм.
Воронки делительные, 250 мл, ГОСТ 8313-75.
Колбы конические, 100, 250 мл, ГОСТ 8613-75.
Мерные пипетки, 1, 2, 5, 10, 50 мл.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74.
Колбы грушевидные, ГОСТ 10394-72.
Стеклянная колонка длиной 1 м, диаметр 3 мм, заполненная неподвижной фазой SE-30 (5%) на хроматоне N-AW DMCS (0,16-0,20 мм).
Фильтры бумажные, беззольные (синяя лента).
Хроматограф "Цвет", "Кристалл-2000" или аналогичный, снабженный детектором по захвату электронов.
Испаритель ротационный, ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
2.4. Отбор и хранение проб.
2.4.1. Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов" от 21.08.79 г., N 2051-79.
Пробы хранят при необходимости в холодильнике.
2.5. Описание определения.
2.5.1. Экстракция.
Почва. Почву сушат на воздухе, просеивают через сито ООО меш), берут навеску в количестве 50 г, помещают в коническую колбу, прибавляют 100 мл смеси для экстракции (1%-ная НС1, метанол + ацетон *= 1:1) и энергично встряхивают на аппарате для встряхивания 15 мин.
Декантируют пробу через бумажный фильтр (синяя лента), а к пробе снова приливают смесь для экстракции ООО мл) и встряхивают 15 мин. Фильтруют пробу на воронке Бюхнера, используя бумажный фильтр (синяя лента). Промывают пробу почвы на фильтре смесью для экстракции. Фильтраты объединяют, переносят в делительную воронку емкостью 500 мл, прибавляют 50 мл н-гексана, энергично встряхивают 30 секунд. Ждут, когда фазы разделятся. Нижнюю ацетоно-метанольную фазу переносят в другую аналогичную делительную воронку, снова прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивают 30 сек. Гексан отбрасывают, когда слои разделятся. Нижний слой переносят в коническую колбу емкостью 500 мл. С помощью 5 М р-ра NaOH устанавливают pH раствора равной 3,5. После этого данный раствор переносят в делительную воронку, прибавляют 80 мл хлороформа и 50 мл дистиллированной воды, встряхивают в течение 5 минут. Ждут, когда фазы разделятся и отделяют нижнюю хлороформенную фазу. Еще дважды повторяют экстракцию ацетоно-метаноль-ной фазы 80 мл хлороформа. Хлороформенные экстракты объединяют, добавляют 50 мл 0,5 М раствора НС1 и производят переэкстракцию пестицида в солянокислый раствор, встряхивая при этом растворы в течение 5 мин.
Когда слои разделятся, нижний хлороформенный слой переносят в другую делительную воронку, прибавляют 50 мл 0,5 М раствора соляной кислоты, встряхивают в течение 5 мин. Нижний хлороформенный слой отбрасывают, а солянокислый объединяют с предыдущим. Устанавливают pH среды, доводят ее значение до величины равной 3,5 с помощью 5 М раствора NaOH. Из соляно-
кислого раствора производят переэкстракцию пестицида снова в хлороформ. Для этого солянокислый раствор переносят в 500 мл делительную воронку, прибавляют 50 мл хлороформа, встряхивают 5 мин. Нижний хлороформенный слой отделяют, а к солянокислому снова прибавляют 50 мл хлороформа, встряхивают 5 мин.
Нижний слой отделяют. Хлороформенные экстракты объединяют, сушат безводным сульфатом натрия, упаривают на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку добавляют i мл ацетона. Из этого раствора аликвоту 2-3 мкл вводят в газовый хроматограф.
Растения (пшеница, ячмень, солома).
Анализируемые объекты измельчают, солому режут ножом. Берут навеску 20 г, помещают ее в коническую колбу емкостью 250 мл, прибавляют 50 мл смеси для экстракции (1% НС1, метанол + ацетон = 1:1). Навеску соломы заливают таким количеством смеси, чтобы она была полностью покрыта растворителем. Пробы энергично встряхивают на аппарате для встряхивания 15 мин. Дальнейшие процедуры аналогичны таковым, описанным для анализа пестицида в почве.
Вола. В делительную воронку емкостью 250 мл помещают 100 мл анализируемой воды. Устанавливают рН=3,5 с помощью 0,5 М раствора НС1. Прибавляют 50 мл хлороформа, встряхивают в течение 5 мин. После разделения слоев, нижний хлороформенный слой отделяют, а к водной фазе прибавляют снова 50 мл хлороформа и встряхивают 5 мин. Нижний слой отделяют. Хлороформенные экстракты объединяют, сушат безводным сернокислым натрием и растворитель упаривают на ротационном испарителе досуха. К сухому остатку добавляют 1 мл ацетона. Аликвоту этого раствора (2-3 мкл) вводят в хроматограф.
2.5.2. Условия хроматографирования:
I л
- рабочая шкала электрометра 20 . 10 А
- скорость протяжки ленты 240 мм/час
- температура термостата колонки - 240° С
- температура термостата детектора - 250° С
- температура термостата испарителя - 275° С
- скорость газа-носителя-азота через колонку - 40 мл/мин
- объем, вводимый в испаритель - 2-3 мкл
- линейность детектирования - 0,2-12 нг
- время удерживания - 62 сек (основной пик).
2.6. Расчет результатов анализа.
Количество пестицида (X), мг/кг или мг/л вычисляют по формуле:
v C.H2.V.100
Х Hi.Vi.p.Ki,где
С - количество пестицида в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг:
Hi- высота пика стандартного раствора пестицида, введенного в хроматог-
раф, мм;
Н2- высота пика пестицида в пробе, мм;
Vi - объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;
V - общий объем экстракта, мл; р - масса анализируемой пробы, мл или г;
Ki - процент определения пестицида в данном виде почв, растений, обусловленный потерями при проведении анализа.
3. Требования техники безопасности.
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.
