Купить бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее
Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.
Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"
Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.
Предисловие
Титрование компонентов реакции
Титрование антигена
Главный опыт
Учет реакции
Предметный указатель
Дата введения | 01.01.2021 |
---|---|
Добавлен в базу | 01.02.2020 |
Актуализация | 01.01.2021 |
08.06.1944 | Утвержден | Главное управление ветеринарии Минсельхоза СССР | |
---|---|---|---|
Издан | Агропромиздат | 1986 г. |
Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:
СПВ4ВОЧНИК
ЛАБСШОРНЬЕ
ИССЛЕДОВАНИЯ В ВЕТШ/1НАРИИ
БАКТЕИ^АЛЬНЫЕ
ИНТЕКЦИИ
ЛАБОРАТОРНЫЕ
ИССЛЕДОВАНИЯ
В ВЕТЕРИНАРИИ
•
БАКТЕРИАЛЬНЫЕ
ИНФЕКЦИИ
Под редакцией Б. И. АНТОНОВА
МОСКВА АГРОПРОМИЗДАТ 1986
— физиологический хлорида натрия с добавлением ионов магния и кальция (для постановки РСК и РДСК) 86 — Хенкса 281 — хлориду натрия феиолезиро-ванные для.РА 86 Реактив биуретовый 328 — йодистый калий 328 Реакция диффузной преципитации в геле 333 — с метилротом 218 — нейтрализации с целью выявления антител к вирусу инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи 332 — непрямой гемагглютинации (РПГА) 332 — преципитации 8 — связывания комплемента (РСК) 334 — торможения гемагглютина-ции (РТГА) 332 — Фогеса — Проскауэра 218 — Эрлиха 181 — метиленового синего 226 Среда Биттера с рамнозой 187 — водно-сывороточная 145 — дифференциальная висмут-сульфат-агар 186 -- Левина 186 --Плоски рева 186 --трехуглеводная с мочевиной 186 --Эндо 186 — для обнаружения сероводорода 216 — для определения способности бактерий расщеплять мочевину 218 н — для посева по Свену — Гарду 187 — Дюбуа — Смита 90 — Заксе 243 — Игла 282, 324 |
— из гидролизата мышцы сердца крупного рогатого скота 252 — из куриного мяса 260 — Кларка 218 — Клиглера 217 — комбинированная Олькениц-кого 216 — Мартена 251, 260 — плотная ВИЭВ для изоляции кампилобактерий 125, 126 — сафранино-железо-новобиоци-новая 123, 124 — Симмонса 216 — с лактозой 252 — с повышенным содержанием лактозы 187 — с теллуритом калия 228 — триптический перевар бычьего сердца 337 — Ферворта — Вольфа в модификации С. И. Тарасова 146 — Флетчера 146 — 6,5%-ного хлорида натрия 228 — Хоттингера 259 — Эдварда 258 — энтерококковая дифференциально-диагностическая 228 Среды индикаторные с амидочерным 168 --с конгоротом 168 --с лакмусом 167 --с метил ротом 167 --с нейтральротом и метиленовой синью 167 --обогащения Кауфмана 186 --Киллиана 186 --Мюллера 186 -- селенитовая 185 — плотные питательные 252 Тест «жемчужного ожерелья» 6,7 Фаготипирование 17—28 Экстракт дрожжевой 252 Эритрит-агар 85 |
СОДЕРЖАНИЕ
©
Предисловие........................ 3
Методы диагностики бактериальных инфекций....... 5
Сибирская язва.................... 5
Методические указания по лабораторной диагностике сибирской язвы ..................... 5
Методические указания по обнаружению возбудителя сибирской язвы в сырье животного происхождения и объектах
внешней среды..................... 9
Временное наставление по применению сибиреязвенного бактериофага «К» ВИЭВ для определения возбудителя сибирской язвы..................... 17
Временное наставление по применению сибиреязвенного фага «Гамма-MBA» для определения возбудителя сибирской
язвы.......................... 28
Временные методические указания по постановке реакции диск-преципитации при диагностике сибирской язвы и идентификации ее возбудителя................ 29
Наставление по исследованию кожевенного и мехового сырья
на сибирскую язву реакцией преципитации ....... 31
Эмфизематозный карбункул................. 37
Методические указания по лабораторной диагностике эмфизематозного карбункула................. 37
Злокачественный отек.................... 40
Методические указания по лабораторным исследованиям
на злокачественный отек животных.......... 40
Брадзот овец........................ 44
Методические указания по лабораторной диагностике брад-
зота овец....................... 44
Инфекционная энтеротоксемия животных и анаэробная дизентерия ягнят......................... 48
Методические указания по лабораторной диагностике инфекционной энтеротоксемии животных и анаэробной дизентерии ягнят....................... 48
Столбняк.......................... 52
Методические указания по лабораторной диагностике столбняка .......................... 52
Ботулизм.......................... 53
Методические указания по лабораторной диагностике ботулизма .......................... 53
Некробактериоз ....................... 56
Методические указания по лабораторной диагностике некро-
бактериоза....................... 56
Копытная гниль овец и коз................ 58
Приложение к «Инструкции по профилактике и ликвидации копытной гнили овец и коз» .............. 58
Временные методические указания по обнаружению возбудителя копытной гнили в патологическом материале от больных овец с помощью непрямого метода иммунофлуоресценции .......................... 59
Бруцеллез......................... 60
Наставление по диагностике бруцеллеза животных ... 60
Паратуберкулез ...................... 89
Наставление по диагностике паратуберкулезного энтерита
(паратуберкулеза) крупного рогатого скота ....... 89
Методика обнаружения в патологическом материале возбудителей туберкулеза и паратуберкулеза методом люминесцентной микроскопии.................. 92
Временное наставление по' постановке реакции связывания комплемента для диагностики паратуберкулеза крупного рогатого скота и овец с антигеном Сибирского научно-исследовательского ветеринарного института ........ 94
Сап............................ 104
Методические указания по лабораторной диагностике сапа 104
Кампилобактериоз (вибриоз)................ 112
Извлечение из временной инструкции по диагностике, профилактике и ликвидации вибриоза крупного рогатого скота и овец........................ 112
Наставление по применению кампилобактериозных (вибриозных) люминесцирующих сывороток при лабораторной диагностике кампилобактериоза (вибриоза) животных .... 120
Рекомендации Центральной ветеринарной лаборатории по приготовлению и применению сафранино-жел зо-новобиоци-
Наставление по применению вибриозных агглютинирующих моноспецифических сывороток.............. 116
новой среды (СЖН) при лабораторной диагностике вибриоза 123 Временные рекомендации Центральной ветеринарной лаборатории по приготовлению и применению плотной среды ВИЭВ
для изоляции кампилобактерий............. 125
Наставление по применению кампилобактериозного (вибри-озного) антигена для реакции агглютинации с вагинальной
слизью (РАВС).................... 126
Лептоспироз......................... 128
Методические указания по лабораторной диагностике леп-
тоспнроза животных.................. 128
Методические указания по применению групповых агглютинирующих лептоспирозных сывороток.......... 146
Методические указания по применению флуоресцирующего
глобулина для диагностики лептоспироза ....... 148
Листериоз......................... 151
Наставление по лабораторной диагностике листериоза животных ......................... 151
Методические указания по применению набора лиофилизи-рованных бактериофагов для идентификации возбудителя
листериоза....... 169
Рожа свиней........................ 170
Методические указания по лабораторным исследованиям на
рожу свиней...................... 170
Наставление по применению сухих рожистых люминесцирующих сывороток (для прямого метода иммунофлуоресценции) .......................... 173
Пастереллез........................ 175
Наставление по лабораторной диагностике пастереллеза птиц 175
Сальмонеллезы....................... 177
Методические указания по бактериологической диагностике
сальмонеллезов животных................ 177
Наставление по применению наборов сывороток сальмонел-лезных О-комплексных и монорецепторных О и Н-агглюти-нирующнх для экспресс-идентификации сальмонелл в РА па
стекле......................... 192
Наставление по применению комплексной и групповых саль-монеллезных флуоресцирующих сывороток (для прямого метода иммунофлуоресценции)............... 195
Временная методика серологической диагностики сальмонеллеза овец в реакции непрямой (пассивной) гемагглютина-
ции (РИГА)...................... 205
Наставление по применению серогрупповых антигенов и сывороток В, С| и Di для диагностики сальмонеллеза в пробирочной реакции агглютинации (РА) ......... 207
Колибактериоз....................... 209
Методические указания по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных....... 209
Наставление по применению агглютинирующих О-коли-
сывороток....................... 218
Диплококковые заболевания............. . . 221
Методические указания по лабораторным исследованиям на пневмококковую (диплококковую) инфекцию животных 221
Стрентококкозы сельскохозяйственных животных...... 224
Методические указания по лабораторной диагностике стреп-
тококкоза животных.................. 224
Методические указания по лабораторной диагностике стрептококковой септицемии птиц............... 228
Методические указания по лабораторной диагностике стрептококкового полиартрита ягнят .............. 230
Методические указания по лабораторной диагностике мыта 233
Псевдомоноз........................ 235
Временное наставление по применению набора О-агглютини-рующих сывороток для диагностики псевдомоноза .... 235
Гемофил езы......................... 237
Временные методические указания по лабораторной диагностике гемофилезного полисерозита свиней....... 237
Временные методические указания по лабораторной диагностике гемофилезной плевропневмонии свиней..... 240
Методические указания по лабораторной диагностике контагиозного метрита лошадей................ 243
Микоплазмозы....................... 248
Методические указания по лабораторной диагностике инфекционной агалактии овец и коз............ 248
Методические указания по лабораторной диагностике инфекционной плевропневмонии коз............ 253
Наставление но диагностике респираторного микоплазмоза
птиц.......................... 257
Реакция агглютинации для диагностики респираторного микоплазмоза птиц с цельной кровью (ККРА) и сывороткой крови (СКРА)..................... 264
Наставление по постановке РСК при перипневмоиии крупного рогатого скота.................. 265
Дизентерия свиней..................... 268
Методические указания по лабораторным исследованиям на
дизентерию свиней, вызываемую трепонемой....... 268
Методические указания по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных................ 270
Методические указания по применению культур клеток в диагностических исследованиях.................. 279
Методические рекомендации по получению, культивированию и использованию в научных и производственных ветеринарных лабораториях первичных, перевиваемых и диплоидных культур
клеток животного происхождения.............. 279
Наставление по применению гидролизата мышечных белков ферментативного сухого (ФГМ-С) для питательных сред тканевых
культур.......................... 298
Рекомендации по профилактике, диагностике контаминнрования культур клеток микроорганизмами и меры по их деконтаминации 299
Методические указания по получению и применению в вирусологической практике перевиваемых линий клеток из лимфоидных
органов крупного рогатого скота и почек теленка...... 314
Методические рекомендации по очистке сыворотки крови крупного рогатого скота, используемой для культивирования клеточных
культур.......................... 326
Временное наставление по получению, контролю и использованию сыворотки крови животных для культивирования клеток и
вирусологических исследований............... 337
Предметный указатель................... 347
ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ В ВЕТЕРИНАРИИ:
Бактериальные инфекции
Составители: Борис Иванович Антонов,
Валерия Валентиновна Борисова, Галина Михайловна Волкова и др.
Заведующий редакцией В. Г. Федотов. Редактор В. Н. Сайта над и. Художник А. И. Бершачевская. Художественный редактор М. Д. Северина. Технический редактор Е. В. Соломович. Корректоры Н. fl. Туманова, Т. Н. Бобрикова, М. В. Писарева
ИБ № 4308
Сдано в набор 13.06.85. Подписано к печати 06-12.85. Т-22156. Формат 84хЮ8‘/«- Бумага тип. №3. Гарнитура литературная. Печать высокая. Уел. псч. л. 18.18. Уел. кр.-отт. 18,48. Уч -изд. л. 27,27.. Изд. № 360 Тираж 2 9000. экз. Заказ Л1? 419 . Цена 1 р. 4 0 к.
Ордена Трудооого Красного Знамени ВО «АгропроМиздат», 107807, ГСП, Москва, Б-53, ул. Садовая-Сласская, 18 Набрано в ордена Октябрьской Революции и ордена Трудового Красного Знамени МПО «Первая Образцовая типография имени А. А. Жданова»Союзполиг-рафпрома при Государственном комитете СССР по делам издательств, полиграфии и книжной торговли: 1 13054, Москва, Валовая, 28
Отпечатано с матриц во Владимирской типографии СоюЗполиграфпрома при Государственном комитете СССР по долам издательств, полиграфии и книжной торговли, 600000, г. Владимир, Октябрьский проспект, д. 7.
ББК 48.73 Л 12
УДК 619:616.9—08(031)
Составители: Б. И. Антонов, В. В. Борисова, Я. М. Волкова, »/7. Я. Каменева, Л. В. Кошеленко, Г. А. Михальский, В. В. Лоповцев, Л. И. Прянишникова, В. Е. Храпова
Лабораторные исследования в ветеринарии. Бакте-Л12 риальные инфекции: Справочник/Сост. Б. И. Антонов, В. В. Борисова, П. М. Волкова и др.; Под ред. Б. И. Антонова.— М.: Агропромиздат, 1986.— 352 с.
В книге даны методы лабораторных исследований патологического материала с целью определения возбудителя нпфекционноЛ болезни. Они изложены по единой схеме: бактериологические и бактериоскопнческие исследования, биопроба, идентификация и дифференциация возбудителей. Методы унифицированы и стандартизированы
Для ветврачей и фельдшеров, лаборантов ветеринарных лабораторий.
3805020000-079 035 (01)-86
305—86
ББК 48.73
© ВО «Агропромиздат», 1986
В деле выполнения решении партии и правительства по дальнейшему развитию животноводства, а также задач, поставленных Продовольственной программой страны, ветеринарной службе большую помощь оказывают ветеринарные лаборатории.
Ветеринарные лаборатории осуществляют диагностику инфекционных и паразитарных болезней животных, выявляют нарушения обмена веществ в их организме, проводят исследования, направленные на предупреждение отравлений, помогая тем самым специалистам совхозов, колхозов и других хозяйств успешно осуществлять лечебнопрофилактические мероприятия. От того, насколько своевременно ставится диагноз, разработаны и рекомендованы профилактические и лечебные меры, зависит успех ликвидации болезней, сохранность поголовья животных и повышение их продуктивности.
Последнее время в лабораториях появилось много приборов и приспособлений, облегчающих труд специалистов и позволяющих проводить исследования на более современном и качественном уровне, с большой достоверностью. В связи с этим многие ранее действовавшие методические указания переработаны.
Кроме того, ежегодно для лабораторной практики предлагаются новые методы диагностики. В отечественной и зарубежной литературе постоянно публикуется большое количество материалов о новых методах исследований, предлагаются различные модификации существующих методик, вводятся дополнительные диагностические тесты.
Ветеринарные лаборатории в своей работе не могут использовать всего многообразия имеющихся в литературе методов исследования или из-за того, что они недостаточно апробированы, или из-за сложности применяемого оборудования. Иногда методы, предлагаемые различными авторами, при определении одних и тех же показателей дают несовпадающие результаты.
В связи с этим в справочник включены методы лабораторных исследований патологического материала, получаемого от больных, убитых или павших сельскохозяйственных животных, апробированные Центральной ветеринарной лабораторией и утвержденные Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР. Книга содержит методические указания по диагностике инфекционных болезней бактериальной этиологии, а также методические указания по применению культур клеток в диагностических исследованиях.
Методики изложены по единой схеме,- взятие и пересылка патологического материала, методы его обработки и обогащения; бактериоско-пические исследования, включая световую и люминесцентную микроскопию; выделение культур возбудителей инфекционных болезней на питательных средах; заражение лабораторных животных как с целью выделения чистой культуры возбудителя, так и определения степени ее патогенности; гистологические исследования; идентификация и дифференциация возбудителей с использованием различных методов; серологические исследования для определения вида возбудителя.
Приведенные в справочнике методы лабораторных исследований унифицированы и стандартизированы. В широком смысле слова унификация и стандартизация подразумевают применение для различных исследований одних и тех же аппаратов, приборов, инструментов, посуды, реактивов, исключая, конечно, специальные методы исследования; применение стандартных (унифицированных) питательных сред и диагностикумов; разработку методических указаний по единой форме. Все это позволяет лабораторным работникам с меньшей затратой сил и средств, на высоком методическом и техническом уровне, качественно и в срок проводить диагностические исследования. Таким образом, стандартизация методов исследования явится способом наведения строгого порядка в работе ветеринарных лабораторий.
Книга предназначена для ветеринарных врачей, фельдшеров, а также лаборантов ветеринарных диагностических лабораторий.
В справочник не вошли материалы по диагностике туберкулеза, так как они пересматриваются и дополняются, поэтому их публикация будет осуществлена в последующих изданиях.
(Утверждено Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 8 июня 1944 г.)
Реакция проводится в водяной бане при температуре 37°С в общем объеме 1,25 мл по 0,25 мл каждого компонента.
Компоненты реакции: сыворотки крупного рогатого скота — испытуемые, заведомо негативную и позитивную — инактивируют нагреванием в водяной бане при 56—58°С 30 мин; антиген; комплемент — сыворотка крови морских свинок (лучше от нескольких), свежая, консервированная или сухая; гемолизин — сыворотка крови кролика, гипер-иммунизированного эритроцитами барана. Рабочий титр не менее 1 : 1000; эритроциты барана (3%-ная взвесь из осадка на физрастворе).
Перед постановкой реакции смешивают равные объемы 3%-ной взвеси эритроцитов и гемолизина в рабочем титре и выдерживают 20 мин при 37°С (гемсистема); физиологический раствор — 0,85%-ный раствор поваренной соли х. ч. на дистиллированной воде
Примечание. Стандартные сыворотки, гемолизин и перипневмо-нийный антиген изготовляют на биофабриках.
Титрование компонентов реакции.
Титрование гемолизина. Делают разведения гемолизина 1 : 100,
1 : 1000, 1 : 1500; 1 : 2000, 1 : 2500, 1 : 3000, 1 :3500, 1 : 4000 и т. д. до 1 : 6000.
Примечание. Если гемолизин консервирован карболовой кислотой, то берут 0,1 мл гемолизина на 9,9 мл физраствора (1 : 100), если же он консервирован глицерином, то следует брать 0,2 мл гемолизина на 9,8 мл физраствора.
Комплемент применяют в разведении 1 : 20, эритроциты (3%-ная взвесь) разливают в пробирки по 0,25 мл.
Взамен перипневмонииного антигена и испытуемой сыворотки в пробирку прибавляют 0,5 мл физраствора.
Контролями опыта титрования гемолизина являются: контроль гемолизина, комплемента, эритроцитов и физраствора.
Опыт проводят в водяной бане при температуре 37—38°С в течение 10 мни.
Титром гемолизина считается наименьшее количество (наибольшее разведение) его, потребное для полного гемолиза 0,25 мл 3%-ной взвеси эритроцитов при комплементе в разведении 1 : 20 в течение 10 мин в водяной бане при температуре 37—38°С.
Рабочей дозой гемолизина для дальнейшего титрования его и постановки главного опыта считается удвоенный титр гемолизина.
Пример. Если титр гемолизина 1 : 3000, то рабочей дозой считается 1 : 1500.
Гемолизин титруют при получении новой серии или в случае подозрения на снижение его титра при хранении.
Титрование комплемента в гемолитической системе. Переменной величиной при этом является количество комплемента, который исследуют в следующих дозах: 0,05, 0,1, 0,12, 0,15, 0,18 0,2Q, 0,22, 0,25 комплемента в разведении 1 : 10,
Схема титрования комплемента в гемолитическом системе следую
щая.
Комплемент в разведении 1:10.....
Недостающее количество физраствора Гемолизин в рабочем разведении . . . . Эритроциты барана
1:40........
Физраствор вместо антигена к сыворотки
0,05 |
0,1 |
0,12 |
0,15 |
0,20 |
0,15 |
0,13 |
0,1 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,18 |
0,20 |
0,22 |
0,25 |
0,07 |
0,05 |
0,03 |
— |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,25 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
0,5 |
Титром комплемента в гемолитической системе считается наименьшее его количество, потребное для полного гемолиза 0,25 мл 3%-ной взвеси эритроцитов при рабочей дозе гемолизина в течение 10 мин в водяной бане при температуре 37—38°С.
Титрование комплемента в бактериолитической системе. Целью титрования является расчет дозы комплемента.
Комплемент титруют в различных дозах с определенным между ними интервалом на двух перипневмонийных, разной активности сыворотках и двух нормальных, с обязательной постановкой контролен самих сывороток (т. е. без антигена).
Сыворотки поступают в реакцию в разведении 1 :5. Дозы комплемента из основного разведения 1 : 10 берут на два интервала ниже титра, полученного в гемсистеме. Если титр комплемента в гем-системе 0,15, то разливку его начинают с 0,1.
На каждое разведение комплемента ставят контроль сыворотки без антигена- Схема титрования комплемента в бактериолитической системе следующая.
Комплемент в разведении 1:10 . . 0,1 0,12 0,15 0,18 0,20 0,22 0,25
Недостающее количество физраствора .............. 0,150,130,1 0,070,050,03 —
Антиген в его титре....... 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
Сыворотка в разведении 1:50 . 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
Водяная баня 20 мин при 37—38°С
Гемолитическая система..... 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Водяная даня 15 мин при 37—38°С
Титром комплемента для главного опыта считается минимальное количество его, потребное для полного гемолиза взвеси эритроцитов в присутствии нормальной сыворотки с перипневмоиийным антигеном и без него при соответствующей задержке гемолиза в присутствии заведомо позитивной перипневмонийной сыворотки в течение 15 мин в водяной бане при температуре 37—38°С; при этом сама по себе перипнев-монийная сыворотка в контрольной пробирке без антигена при данной дозе комплемента не должна давать задержку гемолиза.
Рождение комплемента для главного опыта. Требуется провести исследование 100 пробирок сыворотки. В реакцию входит 200 пробирок (каждая сыворотка в двух пробирках). Титр комплемента в баксисте-
ме — 0,2 в разведении 1:10, следовательно, одна доза чистого комплемента равна 0,02 (0,2: 10=0,02). А всего для реакции требуется 0,02Х X200= 4,0 мл чистого комплемента и 46,0 мл физраствора (0.25Х X 200—4,0=46,0).
Титрование антигена. Перипневмоиийиын антиген применяется в титре, установленном учреждением, его изготовляющим, но предварительно проверяется лабораторией, ставящей реакцию связывания комплемента.
Антиген титруют в РСК на 3 отрицательных и 3 положительных сыворотках.
Положительные сыворотки должны быть различной активности при исследовании по РСК (++++• +++, ++)•
Титрование антигена проводят в пяти рядах пробирок с разведением сывороток 1:5, 1:10, 1 : 20, 1 : 40, 1 : 80. Каждое разведение сыворотки ставят с различным разведением антигена: 20, 40, 60, 80 и 100%.
Схема квадратного титрования антигена следующая.
| ||||||||||||||||||||||||||||||
Водяная баня 15. /шн при 37—38°С |
По этой схеме ставят и остальные разведения сывороток. Одновременно ставят контроли с нормальными сыворотками 1 : 5, а также испытывают антиген на самозадерживающие свойства (без сыворотки). Рабочей дозой антигена следует считать количество антигена, дающее наибольшую задержку со всеми положительными сыворотками, при полном гемолизе с нормальными сыворотками и с той же дозой антигена без сыворотки.
Антшен, работающий в разведении менее 80%, для практического применения не допускается.
Главный опыт. Испытуемые сыворотки, разведенные 1 : 5, инактивируют в водяной бане 30 мнн при 56—58°С и разливают в две пробирки по 0,25 мл.
В первые пробирки добавляют по 0,25 мл перипневмонииного антигена в рабочей дозе, а во вторые — по 0,25 мл физиологического раствора. Затем во все пробирки добавляют по 0,25 мл комплемента в установленной титрованием рабочей дозе и ставят в водяную баню на 20 мин при 37—38°С.
После этого во все пробирки разливают гемолитическую систему по 0,5 мл и снова помещают в баню на 15 мин при 37—38°С.
При массовом исследовании допускается ставить реакцию без конт-ролей (то есть сыворотки без антигена), но при обязательном повторении исследований во всех случаях положительных и сомнительных реакций с контролем сывороток на самозадерживающие свойства.
Учет реакции. Первый учет результатов главного опыта проводят сразу по истечении 15 мин пребывания проб в бане. Окончательный учет реакции проводят через 12—18 ч хранения пробирок в прохладном месте,
Реакцию оценивают: положительная ++++, +++, ++l/t; сомнительная Н—К +; отрицательная —. Степени задержки гемолиза, выраженные крестами, соответствуют следующим процентам гемолиза эритроцитов: -(-+++ — гемолиз эритроцитов от 0 до 10%; +++ —
от 10 до 40%; +-{-1/2 — от 40 до 50%; +Н--от 50 до 70%; + — от
70 до 90%;--от 90 до 100%.
Данные всех титрационных опытов и особенностей реакций вносят (записывают) в дневник серологических работ лаборатории.
Во всех случаях положительных и сомнительных результатов сыворотки повторно исследуют в разведениях 1 : 10, 1 : 5 с двумя заведомо активными и проверенными перипневмонийными антигенами. Результат исследования сообщают словами: положительный, сомнительный, отрицательный, с указанием крестов.
Примечание. Жйвотных, сыворотки которых дали сомнительную реакцию, через неделю исследуют повторно,
е
Агар глюкозо-кровяной 227 — дрожжевой 27 — картофельный 82 — кровяной 230 — молочно-солевой 228 — мясо-пептонный печеночно* глюкозо - глицериновый (МППГГА) 82 — печеночно-аминопептидный 85 — печен очно-глюкозо-глицериновый (ГИТА) 82 — плотный печеночно-сывороточный 85 — полужидкий печеночно-сывороточный 85 — полужидкий с дефибриниро-ванной кровью 248 — сывороточно-декстрозный 85 — шоколадный 239 Бульон глюкозо-сывороточный 227 — дрожжевой 27 — мясо-пептон ный печеночный (МППБ) 82 — печен оч но-глюк озо-глицериновый 82 — с желчью 10%-ный 186, 227 — 40%-ный 230 Вода мясная 82 — печеночная 82 Выбор питательных сред 271 Гель агаровый 1%-ный 31 Дезагрегация ткани 314 Жидкость Карнуа 309 Индикатор для определения анаэробных условий 39 Консервирующая смесь глицериновая 185 --фосфатная буферная 185 Лизис желчью 225 |
Метод выявления капсулообра-зования 13, 14 — определения вирулентности сибиреязвенных культур 14 — флуоресцирующих антител (МФА) 180 Молоко с метиленовым синим 228 — с 0,02%-ньм метиленовым синим 230 Обнаружение индола 217 Окраска мазков гематоксилин-эозином 309 --по Козловскому 81 --по методу Гипса 239 --по Романовскому — Гим- зе 309 --по Стампу 81 --по Фельгену 309 --по Шуляку — Шину 82 Определение гемолитической активности 8 — концентрации углекислого газа 85 Получение и подготовка эритроцитов барана для постановки РСК и РДСК 86 Приготовление индикаторных бумажек 187 Раствор антибиотиков 272 — веронал-мединаловый буферный 329 — версена 282 — гидролизата лактоальбумииа 0,5%-ный 283 — гидролизата мышечных белков 0,3%-ный 282 — глицерина 216 — двууглекислого натрия 282 — двухромовокислого калия 279 — полиэтиленгликоля 326 — Тироде 281 — трипсина 283 — уксусной кислоты 282 |