ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ЖИВОТНЫХ

b

• CAHKT-11РГЕРВУРГ • •МОСКВА •КРАСНОДАР-•2015-

Индикация возбудителя инфекции (лат. tndicatic — указание) — выявление и идентификация патогенных микроорганизмов в различных объектах.

Инокуляция возбудителя (лат. tncculatic — прививка) — введение возбудителя путем инъекции (искусственное заражение или внесение его в организм животного членистоногими переносчиками при укусах).

Консервирование вирусов (лат. conservare — сохранять) — общее название методов воздействия физическими к (или) химическими факторами на какие-либо объекты с целью длительного сохранения в них вирусов.

Контаминация (лат. contamtnatlo — смешение) — обсеменение поверхности тела животного, предметов ухода, почвы, воды, кормов, биопрепаратов и других объектов патогенными микроорганизмами.

Культивирование вирусов — выращивание вирусов в искусственных условиях.

Культуры клеток (клеточные культуры) — клетки многоклеточного организма, живущие вне его в искусственно созданных условиях средь:.

Куриный эмбрион — оплодотворен кос куриное яйцо, выдержанное в инкубаторе.

Лабораторные животные — животные, используемые в лабораториях при проведении исследований (мыши, крысы, кролики, морские свинки, хомяки, голуби и др.).

Лиофидизация (греч. 1уо — растворяю + phUeo — люблю) — высушивание предварительно замороженного материала в глу* боком вакууме.

Моноклональные антитела — строга специфические антитела, способные выявить минимальные различия в химическом составе и пространственной конфигурации молекул, являются продуктом отдельных клонов антителосродуцирую-щих клеток.

Парные сыворотки — сыворотки, взятые в самом начале заболевания и 2...3 недели спустя. Повышение титра антител в 4 раза и более считается основой положительной реакции.

Пассаж (фр. passage — переход) — последовательное заражение восприимчивых объектов (животные, куриные эмбрионы, культуры клеток) микроорганизмами.

Полимеразная цепная реакция (от англ. Polymerase Chain Reaction, ПЦР) — метод генодиагностики, основанный на многократном увеличении копий строго определенных фрагментов

Кроткий словарь испалымакных етеримриых пермаяоа

тш/т мной i»4iiimim4Hiiiiini4lTH —■ пи—»на —

молекулы ДНК вируса при помощи фермента термостабильной ДНК-иолимеразы.

Реакция гемагглктшацнм (РГА) — метод обнаружения и идентификации вирусов, основанный на способности многих вирусов, обладающих тканевым тропизмом, агглютинировать эритроциты определенных видов животных.

Реакция мммупофлуорссценцин (РИФ) (лот. fluoreacena -светящийся) — серологическая реакция, основанная на взаимодействии антиген — антитело, при этом один из компонентов, участвующий в реакции, связан с флуоресцирующим красителем.

Реакция нейтрализации (PH) — метод идентификации вируса, основанный на феномене потери им ннфекционыости н результате взаимодействия со специфическими антителами.

Реакция связывания компемента (РСК) — метод серологического исследования, основанный на способности образующегося комплекса антиген — антитело связывать комплемент, что выявляется по отсутствию гемолиза при добавлении гемолизина и эритроцитов.

Реакции торможения гемагглютинации (РТГА) — метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов вирусом, в присутствии специфических к нему антител.

РНК-содержащие вирусы — вирусы, имеющие один тип нуклеиновой кислоты — РНК, у большинства она представлена одной цепью, у некоторых — двухцепочечной структурой.

Ссровариант — самостоятельная группа внутри определенного вида и серогрулпы (серотипа) микроорганизмов, обусловленная наличием антигенов, отличающихся от антигенов других микроорганизмов этого вида и серогруппы (серотипа), что выявляется с помощью серологических реакций.

Серогруппа (серотип) — самостоятельная группа внутри определенного вида микроорганизмов, обусловленная наличием антигенов, отличающихся от антигенов других микроорганизмов этого вида, что выявляется с помощью серологических реакций.

Серологические реакции — реакции, широко используемые при постановке диагноза инфекционных болезной, методы обнаружения антител и антигенов в крови и других тканях.

Сыворотка крови (лат. serum — сыворотка + sanguis — кровь) — составная часть кропи, представляющая собой плазму, из которой удалены форменные элементы и фибрин в процессе свертывания крови.

Тельца включения — своеобразные морфологические образования, обнаруживаемые» цитоплазме или ядрах клеток определенных тканей при некоторых вирусных инфекциях и состоящие из скопления вирионов и вирусных белков.

Термолабкльность (греч. thermo» — теплый + лат. labilis — нестойкий) — неустойчивый к тепловому воздействию, изменяющийся при нагревании.

Термостабильность (греч. thermo» — теплый -I- лат. stobUis — неизменный) — сохраняющий свои свойства при нагревании.

Титр вируса — концентрация инфекционных единиц вируса в определенном объеме материала.

Цитопатогеыное действие вирусов (ЦПД, цитопатический эффект) — специфическая морфологическая деструкция (разрушение) и функциональная патология зараженных вирусами клеток в культурах.

Штамм (нем. etamm — род, корень) — культура микроорганизмов одного вида с одинаковыми морфологическими и биологическими свойствами.

Элементарные тельца -— см. Влрион (2, 8).

«ШИШ «МЯМПИ!

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ

СПИСОК

1.    Лабораторные исследования в ветеринарии. Вирусные, риккетсиозные и паразитарные болезни : справочник / под ред. В. И. Антонова. - М. : Агроироымадат, 1987. — 240 с.

2.    Бакалов,И.А. Эпизоотологический словарь-справочник/ И. А. Бакулоп, Г. Г. Юрков, В. А. Ведерников {и др.]. — М.: Россе льхозиз дат, 1986.

3.    Иымм. Э. М. Словарь ветеринарных микробиологических и вирусологических терминов / Э. М. Иымм, К. А. Петерсон, Э. А. Аавср {и до.]. — М.: Росагропромиэдат, 1989.

ПРЕДМЕТНЫЙ

УКАЗАТЕЛЬ

Агар мясо*пептоныый (МЛА) 101, 109, 126, 326, 387, 444, 466, 476, 483, 642, 688 Альбумин бычий 7, 226, 618 Аппарат Киппа 126, 480 Бульон мясо-пептониый (МПБ) 78, 101, 109, 126, 326, 444, 466, 476, 483, 496, 642, 688 —    тршггозо-фосфатный 619 Буфер вероналовый 36, 376 —    бораткый 146 —    фосфатно-солевой 174, 316, 328, 561,604 —    колий-фосфатный 231, 236, 407 —    к арбонатн о-би карбонатный 336, 601, 604, 618 Гемолизин 25, 114, 300, 369,    607 Гемолитическая система (гемснстека) 26, 116, 216 Жидкость Руге 106, 446 —    Карнуа 108 Иммуноасцитическая жидкость (ИАЖ) 84 Комплемент 27, 116, 216, 300, 370,    607

Метод вирусоскопии 99, 443, 648 —    Кербора 66 —    иммунофермснтного анализа (ИФА) 88, 159, 173, 228, 233, 244, 314, 328, 336, 349, 406, 409, 436, 661, 603, 609, 617 —    кофил-тоста 514 —■ перекрестного иммунитета 64 —    полимеразной цепной реакции (ПЦР) 180, 263, 307, 342, 416, 426, 625 —    Рида и Менча 66, 242, 297, 324, 380, 394, 600, 623, 662,656 —    электрскной микроскопии 327, 603 Окраска гистопрепаратов по Ленцу 80 —    Турбиной 684 —    Туревичу 81,684 —    мазков по Борману — Гайнуллиной 74 —    Михику 74 —    Морозову 100, 446 —    Муромцеву 73 —    Пашену 100, 447 —    Селлерсу 74 Перевиваемая линия почки свиньи (СПЭВ) 70, 386, 392

---

—    культура клеток ВНК-2/ 18, ПО —    культура клеток почки иоросеяка (РК-25) 289, 892 Перви'шо-трипсиниэкровнл-ная культура клеток почки свиньи (ПЭС) 70, 141, 886 —    почки эмбриона коров (ПЭК) 141, 218, 289 —    селезенки эмбриона коров (СЭК)218 —    легкие эмбриона коров (ЛЭК) 218 —    тестикулов бычка (ТВ) 218, 239 —    почка ягненка ПО Раствор 30-50% -кого стерильного глицерина 21, 72,100, 108, 386, 482, 688, 616 —    азида натрия 600 —    азотнокислого серебра 106, 446 —    Альсевера 55, 271, ЗС1 —    бис-диаэобенэидииа 55 —    борно-боратный буферный 576 —    бромистого эти дня 180, 253, 306, 342, 416, 625 —    версена 17, 69, 296 —    гекснметафосфата натрия 215 —    забуференый физиологический (ЗФР) 7, 298, 325, 353, 388, 399, 563, 596 —    лимоннокислого натрия 127,136, 402, 448, 458, 469, 476, 535 —    мединал-веронвловый 83, 569 —    мертиолята 376, 600 —    натрия хлористого 7, 171, 215, 269, 276, 287, 362, 376, 392,571,611 —    трипсина 18, 69, 296 —    физиологический 21, 54, 78. 83, 101,110, 127, 134. 212, 236, 257, 268, 266, 308.

364, 367, 419, 428, 444, 448, 455, 469, 475, 482, 607, 585, 542, 547, 554. 616, 630 —    фосфатис-буферный 7, 21, 54, 77, 109. 215, 229, 234, 271,294,322, 363,368, 362, 367, 386, 448, 502. 507. 591,620 —    формалина 86, 100, 108, 482, 503, 637, 617 —    Хонкса 18, 70, 87:141, 211, 240, 296, 328, 377, 387, 486, 492,    635. 589, 616 ’ —    хромоген-субстратный 318, 332, 338, 353, 564, 606 —    Эванса 299 —    Эдиигтоиа 108 —    Эрла 18, 296, 589 Реакция гемагглютинации (РГА) 127, 135.221,270, 359, 403, 449, 459, 472, 477, 643,697 —    гемпдеорбции (РГАд) 142, 220 —    диффузионной преципитации (РДП) 4, 75.118, 145. 214, 268, 280, 376. 483, 488, 493,    500, 536, 545, 652, 599 —    длительного связывания комплемента (РДСК) 113 —    иммунолиффузии (РИД) 154, 170, 276 —    имкунофлуоресценции (РИФ) 77,112,142, 212, 242, 262, 268, 298, 322, 378, 386, 516, 552, 591 —    иммуноосмофореэа 84 —    иммуиоллектроосмофореял (РИЭОФ) 569, 573 —    нейтрализации (PH) 69, 86, 143. 227, 241, 324,379, 389, 393, 395, 464, 493, 497, 522, 543, 548 —    нейтрализации вирусных гемйгтлютинияов (РНВГ) 226 —    непрямой гема1тлютинвции (РИГА) 83, 227,325,494, 501,516

---

—    непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ) б, 112, 292, $22 —    пассивной гемагглютинацин (РПГА) S3 —    подавления иммунофлуоресценции 2t3, 386 —    радиальной кммунодкф* фузии (РРИД) б, 276 —    серо защиты (РЗ) 66 —    связывания комплемента (РСК) 24, 36, 215, 268, 299, 368, 507 —    угнетения связывания комплемента (РУСК) 59 —- торможения (задержки) гемагтлютиняции (РТГА, Р8ГА) 126, 135, 144, 221, 262, 265, 272, 367, 361, 399, 448,457, 477, 697 —    гемадеорбции (РТГАд) 142, 220, 262 —    непрямой гемагглютинации (РТНГА) 225 Среда 190,323, Ж, 486, 518, 640, 690 —    0,5% -ногогидролизаталак-тальбумкна 18, 70,110,

240. 323, 386, 486, 518, 540, 589 —    б% -ногогемогидролизота 386 —    Игла 18, 70,110, 486, 518, 540, 690 —    Игла (МЕМ) 289, 393 —    Китта-Тароцци 326, 542 —    поддерживающая 18, 323, 386, 393, 486, 618, 640, 590 —    ростовая 18, 296, 393, 486, 618, 690 Тельца Бабеоа — Негр и 74 Термолабильные ингибиторы 126, 403, 449, 480 Термостабклькые ингибиторы 126, 480 Тканевая цитопатичеекпя доза (ТЦД) 18, 70, 87, 143, 380, 394, 544 Цитолатическое действие (1ЩД)19, 70,87, 110,143, 219, 241, 324, 380, 388, 394, 486, 644 Эритроцитарный диагностикум 55, 83, 325

---

СОДЕРЖАНИЕ

1. Болезни, общие для всех

или нескольких видов животных...................5

Ящур..........................................5

количественному определению антител к вирусу ящура в сыворотке крови животных (утверждены 10 февраля 1983 г., № 115-ва)............5

1.2.    Методические указания по выделению и идентификации штаммов вируса ящура (одобрены и рекомендованы

1 б октября 1973 г„ б/н)................20

Бешенство....................................72

1.3.    Методические указания

□о лабораторной диагностике бешенства

(утверждены 27 февраля 1970 г., б/н).....72

Болезнь Ауески.......... 82

1.4.    Методические указания по лабораторной

диагностике болезни Ауески животных (рекомендованы 18 мая 1978 г., б/н)......82

1.5.    Инструкция по применению набора для определения антител к гликопротеину gl

свиней методом конкурентного иммунофермситного анализа

«ZETECT-Серелиза-АУЕСКИ-Ат*........88

Оспа.........................................98

Катаральная лихорадка крупного

рогатого скота, овец и коз.......................107

1.7. Методические указания по лабораторной диагностике катаральной лихорадки крупного рогатого скота, овец и коз (утверждены 11 июня 1986 г., М 432-5) .. 107

2. Болезни лошадей..................... 123

Грипп.............. 123

Риноишшмония ................. 140

2.3.    Методические указания

по лабораторной диагностике ркколиевмошгн лошадей (утверждены 27 августа 1980 г., б/н)..... 140 Инфешдоонная анемия ..................145

2.4.    Инструкция по применению набора для диагностики инфекционной

преципитации (РДП)

(утверждена 24 марта 2009 г.)..........145

3. Болезни крупного рогатого скота.................153

Лейкоз.............. 153

3.1.    Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота (утверждены 23 июля 2000 г.,

М 13-7-2/2180)......................153

8.2.    Инструкция по применению набора

3.4. Инструкция по применениютест-системы «ЛЕЙКОЗ* для выявления вируса лейкоза крупного рогатого скота (КРС) методом

по лабораторной диагностике вирусных рссиприторно-кишечных инфекций крупного рогатого скота

(рекомендованы 25 июля 1978 г.,б/ц).... 208 Вирусная диарея..............................228

8.6.    Наставление по применению набора компонентов для диагностики вирусной диареи -- болезни слизистых крупного рогатого скоте методом

и у.муноферментного анализа (утверждено 16 июля 1997 г.,

№ 13-7*2/1012)......................228

3.7.    Инструкция по применению набор для диагностики вирусной диареи — болезни слизистых КРС методом иммуноферментного анализа

3.8.    Методики по исследованию спермы крупного рогатого скота

на контаминацию вирусом инфекционного ринотрахеита — пустулезного вульвовагинитя (ИРТ-ИПВ) (утверждена 8 февраля 1983 г., б/н).....238

3.9.    Инструкция по применению набора для определения антител к вирусу инфекционного ринотрахеита/ инфекционного пустулезного вульвовагинитя крупного рогатого скота в сыворотке крови методом непрямого

и мм у иоферментного анализа

«ZETECT-Серелиоа-ИРТ/ИПВ-Ат*......244

3.10. Инструкция по применению тест-системы

для диагностики инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота методом полимеразной цепкой реакции (утверждена 21 мая 2009 г.)............253

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИРУСНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ЖИВОТНЫХ

Составители:

П. И. Барышников,

В. В. Разумовская

Издание второе, исправленное

ДОПУЩЕНО

Министерством сельского хозяйства РФ в качестве учебного пособия для студентов вузов, обучающихся по направлению подготовки (специальность) •Ветеринария»

ДОПУЩЕНО

УМО вугов РФ по образованию в области зоотехнии и ветеринарии • качестве учебного пособия для студентов вузов, обучающихся по направлению подготовки (специальности) »Ветеринария•

(квалификация (степень) •Ветеринарный врач»)

ь

• САНКТ-ПЕТЕРБУРГ • МОСКВА • КРАСНОДАР • •2015-

Парагрипп .............................262

3.11.    Наставления по применению набора диагностику мов naparpimua*3 КРС (утверждено 26 сентября 1966 г.,

М 13-7-2/748)....................... 262

3.12.    Временные методические указания по диагностики п&рагриппа-З крупного рогатого скота методом выявления секреторных антител в реакции торможения гемдгтлютинАДИИ (РТГА)

Коронавирускый энтерит.......................270

3.14. Наставление по применению набора для диагностики коронавирусного энтерита крупного рогатого скота методом гемагглютинацик (утверждено 11 августа 1660 г., б/н).....270

4. Болезни мелкого рогатого скота .................276

Адеиоматоэ овец и коз.........................276

4.1.    Временные методические указания по лабораторной диагностике аденоматоза овец и коз

(утверждены 2 июля 1985 г.)...........276

Виспа-мэди...................................280

4.2.    Временное наставление

(утверждено 7 июля 1092 г.)............280

5. Болезни свиней ..... 285

Классическая чума....... 285

5.1. Методические указания

ББК 48.7я73 Л 12

Л 12 Лабораторная диагностика вирусных болезней животных / Сост. Л. И. Барышников, В. В. Разумовская: Учебное пособие. — 2-е иэд., испр. — СПб.: Издательство «Лань», 2015.— 672с.: ил. — (Учебники для вузов. Специальная литература).

ISBN 978-5-8114-1882-4

Учебное издание содержит действующие методические указания, наставления и инструкции по лабораторной диагностике вирусных болезней животных, утвержденные Министерством сельского хозяйства СССР. РФ и Россельхознддэором РФ. Документы систематизмрованы по видам животных, » большинстве прошли многолетнюю а апробацию в Алтайской краевой ветеринарной лаборатории к включены в «Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контрола безопасности сырья животного и растительного происхождения» (нс состоянию на июль 2011 г.). Приводятся предметный указатель к библиографический список.

Предназначаю для студенте*, обучающихся по специальности «Ветеринария» и направлению «Ветеринарно-санитарная экспертиза», ветеринарных орпчей и лаборантов ветеринарных лабораторий.

ББК 48.7я73

Рецензенты:

И. И. ГУСЛАВСКИЙ — доктор ветеринарных наук, профессор кафедры микробиологии, эпизоотологии, паразитологии и ВСЭ Алтайского государственного аграрного университета;

В. И. ПЛЕШАКОВА — доктор ветеринарных наук, профессор, зав. кафедрой ветеринарной микробиологии, вирусологии и иммунологии Омского государствеиною аграрного университета им. П. А. Столыпина;

В. А СИНИЦЫН — доктор ветеринарных наук, зао. отделом ФГБУ «Новосибирская межрегиональная ветеринарная лаборатория».

Обложка О Издательство «Лань», 2015 Е.А. ВЛАСОВА О Коллектив авторов, 2016 О Издательство «Лань»,

художественное оформление, 2015

ИНФЕКЦИОННЫЙ БЮНХИТ

6.14.

МЕТОД И¹! ЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР (утверждены 31 июля 1980 е*. Л* 11б-6а)

X. Общие положения.

1.1.    Лабораторная диагностика инфекционного бронхита кур (ИБК) заключается в:

■    выделении вируса из патологического материала на куриных эмбрионах (КЭ) и его идентификация в реакции нейтрализации (PH) на КЭ или а реакции диффузной преципитации (РДП);

■    выявлении антител в сыворотке крови кур в реакции непрямой гекагглютинации (РИГА), РДП или PH;

■    постановке биопробы на цыплятах.

1.2.    Диагноз на инфекционный бронхит устанавливают на основании результатов лабораторного исследования, анализа эпизоотологических и клинических данных, а также патологоанатомических изменений.

2. Отбор st подготовка материала.

2.1.    В ветеринарную лабораторию для выделения вируса направляют б...10 клинически больных цыплят, от которых берут кусочки гортани, трахеи, легких и используют их для вирусологических исследований. Материал можно хранить при температуре -Ю...-21°С в течение

7.. .10 дней.

2.2.    Патологический материал растирают в ступке и готовят 10%-ную суспензию на растворе Хенкса, содержащем антибиотики (пенициллин и стрептомицин по 1000 ЕД/мл), центрифугируют при 1500 об/мин в течение 15 мин. На-досадочную жидкость отсасывают, выдерживают при температуре 40°С в течении 1...2 ч и используют для заражения КЭ.

2.3.    Для постановки лабораторного диагноза методом выделения вируса и его идентификации требуется 15...21 день, серологическим методом — от 2 до 3 недель.

8. Выделение вируса инфекционного бронхита кур.

3.1.    Вирус ИБК выявляют на 8...10-дневных КЭ, полученных из хозяйств, благополучных по инфекционным бо-лозням птиц. Эмбрионы заражают в аллантоисную полость в дозе 0,2 мл. После заражения их инкубируют при температуре 37°С и ежедневно овоскопируют.

КЭ, погибшие в течение 24 ч, не учитывают.

КЭ, погибшие через 2...7 дней, и все оставшиеся живыми вскрывают и отбирают экстраэмбриональную жидкость.

3.2.    Признаками поражения КЭ вирусом ИБК считают гибель КЭ на 2...7-й день, отставание их в росте, ♦карликовость» и скручивание в шар.

3.3.    Если КЭ не погибают в первом пассаже, проводят второй и третий пассажи, используя для заражения экстра-эмбриональную жидкость предыдущего пассажа.

4.    Идентификация выделенного вируса в PH.

4.1.    В ряду пробирок готовят разведение исследуемого материала (экстраэмбриональную жидкость) от 10 до 10 в объеме 0,6 мл. К каждому разведению добавляют равный объем специфических к вирусу ИБК сывороток типа Массачусетс и Коннектикут, предварительно разведенных 1:2 и проинактивиро-ванных при +5б°С в течение 30 мин. Смесь встряхивают и оставляют на 1...2 ч при температуре 40°С. После этого каждым разведением вируса с сывороткой заражают по 4 КЭ в дозе 0,2 мл в аллантоисную полость. Для контроля заражают КЭ смесью вируса в тех же разведениях на растворе Хенкса. Для разведения вируса и сывороток используют среду Хенкса или стерильный физиологический раствор с антибиотиками (пенициллина и стрептомицина по 100 ЕД/мл).

4.2.    Учет PH проводят на 5...7-Й день после заражения КЭ. Подавление размножения вируса специфической сывороткой при гибели КЭ в контроле указывают на видовую принадлежность вируса.

5.    Идентификация выделенного вируса в РД11.

5.1. Компоненты реакции:

■    специфическая сыворотка,

■    специфический антиген (хорионаллантоисная оболочка КЭ через 48 ч после заражения полевым вирусом).

6.2.    Приготовление шаровой среды. Для постановки реакции готовят 1%-ный гель на агоре «Дифко» с 8% хло-ристого натрия, pH 7,0. Агар, расплавленный и остуженный до 50...56°С, разливают в чашки Петри. В слое застывшего агара при помощи штампа нарезают лунки диаметром 5 мм, с расстоянием между лунками 5 мм.

6.3.    Постановка реакции. В центральную лунку вносят специфическую сыворотку, в лунки по окружности — испытуемый материал и положительный антиген. Чашки Петри ставят при температуре 37°С.

5.4.    Учет результатов проводят через 24...48 ч после постановки реакции. Реакция считается положительной, если образуются линии преципитации между лупками с исследуемым антигеном и специфической сывороткой при положительном результате в контроле (специфическая сыворотка + специфический антиген).

в. Ретроспективная диагностика.

6.1.    Исследуют пробы сывороток от больных и переболевших птиц. В PH используют смесь 5... 10 проб сывороток.

6.2.    Постановка РИГА. Исследуемые и контрольные сыворотки (специфическую и отрицательную) разводят двукратно в объеме 0,025 мл (при помощи аппарата Такачи) 1%-ным раствором нормальной лошадиной сыворотки на физиологическом растворе. К указанному разведению добавляют по 0,025 мл (по одной капле) эритроцитарногодиа-гностикума.

Смесь сыворотки с антигеном осторожно встряхивают и оставляют на 1...2 ч при комнатной температуре. Реакцию можно ставить макрометодом.

6.3.    За диагностический титр антител принимают разведение сыворотки, которое вызвало агглютинацию эритроцитарного диагностикума 1:16 к выше.

6.4.    Постановка РПД описана в п.5.

6.5.    PH описана в п. 4 при выявлении антител равноценна вирусовыделению на КЗ, так как она выявляет серотип вируса ИБК, циркулирующего в хозяйстве. Исследуемые сыворотки, имеющие индекс нейтрализации и выше, считаются положительными.

7. Биологическая проба на цыплятах.

7.1.    Биопробу проводит на цыплятах 18...25-дневного возраста из благополучного по инфекционному бронхиту птицехозяйству. Десяти цыплятам интратрахеально вводят по 0,2...0,3 мл суспензии, полученной, как указано в п. 2. За цыплятами ведут ежедневное наблюдение в течение 7 дней, отмечая признаки заболевания.

7.2.    При наличии в исследуемом материале вируса ИБК у цыплят через 18...48 ч иосле заражения появляются хрипы, чихание, угнетение (сонливость).

С изданием настоящих методических указаний Наставление по лабораторной диагностике инфекционного бронхита кур, одобренное Главным управлением вегеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 7 мая 1973 г., утрачивает силу.

umnummwniNi

КРАТКИЙ СЛОВАРЬ ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ВЕТЕРИНАРНЫХ ТЕРМИНОВ

Антигены (анти + грсч. genes — порождающий) — чужеродные для организма высокомолекулярныеорганкческие вещества коллоидной структуры (белки, белково-липидные и белково-полисахаридные комплексы), способные при поступлении (введении парентерально) вызывать синтез особых глобулинов-антител и вступать в специфическое взаимодействие с ними.

Антитела (анти. + тело) — противотела — специфические белки (иммуноглобулины), образующиеся в организме под воздействием антигенов. Они накапливаются в сыворотке крови и тканях, вступают в специфическую связь с соответствующими антигенами и разрушают или обезвреживают их.

Биологическая проба (биопроба) — один из методов диагностики инфекционных болезней с помощью заражения патологическим материалом подопытных животных (куриных эмбрионов, культур клеток) и их исследования.

Вкрион — полноценная внеклеточная вирусная частица.

Вирусовыделен ко — выделение возбудителей инфекции из организма больного животною или вирусоносителн.

Вирусоноситсльство — наличке возбудителя инфекции в определенных органах и тканях клинически здорового животного, не сопровождающееся иммунологической перестройкой организма.

Вирусы (лат. virus — яд) — облигатные внутриклеточные паразиты, отличающиеся от растительных я животных организмов малыми размерами, отсутствием клеточного строения и автономного метаболизма, наличием только одного типа нуклеиновой кислоты и деэъюнктивкым способом размножения.

КротмА словарь ислалмоввАкнх ветеринарных терминов

Й1К ««OIIMI п п»1 II <МИ«:и IIIUMMI ■ iliurailtitwiil' ка<

В. Сеиоболочечные — вирусы, в структуре которых отсутствует липопротеидная оболочка.

В. оболочечные — вирусы, в структуре которых присутствует литтопротеидная оболочка.

Вкрусоскопия (вирусы 4- skopeo — смотрю, наблюдаю) — метод микроскопического изучения морфологии вирусов.

Гемагглютинация (греч. halma— кровь + agglutirMtio —• склеивание) — склеивание и выпадение в осадок эритроцитов под воздействием вирусов, бактерий, токсинов идр., способных адсорбироваться на поверхности эритроцитов, в также ге-м агглютининов.

Гемадсорбцкя (греч. haima — кровь + adacrbtlo — поверхностное поглощение) — способность культур клеток, зараженных вирусами, адсорбировать эритроциты различных животных, что объясняется включением в плазматическую мембрану синтезирующихся вирусных белков.

Диагностика (греч. diagnostics — способный распознавать) — раздел клинической ветеринарии о методах исследования животных для распознавания их болезней и состояния организма с целью назначения необходимого лечения и профилактических мероприятий.

Диагностический набор — набор стандартных препаратов, используемых для постановки диагноза (антиген, специфическая и контрольная сыворотки идр.).

ДНК-зондов метод — метод генодиагностики, основанный на способности меченой одноцепочечиой молекулы ДНК взаимодействовать с комплементарной ей молекулой нуклеиновой кислоты определенного вируса с образованием двухцепочечкой структуры.

ДНК-содержащме вирусы — вирусы, имеющие один тип нуклеиновой кислоты — ДНК, у большинства она представлена двухцепочечной структурой, у некоторых одной цепью.

Идентификация (лат. identlflco — отождествляю) — признание тождественности, опознанио-опрсдсление видовой (типовой) принадлежности микроорганизма на основании всестороннего изучения его свойств.

Нммупоферментный анализ — группа методов, пооволяю-щих выявлять комплекс антиген — антитело с помощью субстрата, который расщепляется ферментом (пероксидалой, щелочной фосфатазой идр.) с появлением окрашивания.

Инактивация вирусов (лат. inactivu» — неактивный) — уничтожение инфекционной активности вирусов путем повреждения генома физическим или химическим воздействием.