ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии, болезнями растений и сорняками

"УТВЕРЖДАЮ"

Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

¥21 .тт.

# 3005-64

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОШАРУЖЕНИЮ РИЩЩА-П В ВОЗДУХЕ МЕТОДОМ ХРОМАТОГРАФИИ В ТОНКОМ СДОЕ СИЛИКАГЕЛЯ И ШРРДВШИЮ ЕГО ФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ.

Мол.масса 288,35

Рицид-П при 18°С представляет собой прозрачную жидкость о желтоватым оттенком, оо слабым валахом. Плотность ржцида-Д - 1,099 г/мд. Температура кипения 128°С )прн 0,04 мы рт.от./.Цри 18°С в воде растворяется 0,1£ рнцида-П.Растворим в ацетоне, гексане,метиловом, втмловом.бензиловом спиртах, ксилоле и других органических растворителях.

Ржцкд-П выпускается в виде 50$С-го концентрата вмульожя, кмепцей оветло-корнчненую окраску.

Рнцид-Q является фунгицидом ,рекоиендовашшм для борьбы о дирикуляриозом риса.

ДДК ржцида-П в воздухе рабочей воны для условий оельокохозяй -отвенного применения -0,3 мг/м³ .

2.1. Основные положения.

2.I.IЛрлнцип метода. Метод обнаружения ришда-П основан на И8вхече> ижж препарата иа исследуемых проб метыовш спиртом и на последующем

451

нарушения его методом хроматографии в тонком слое силикагеля в системе растворителей:бензол-диэтиловый эфир/8:2/,проявителем пятен на хроматограмме служит смесь равных объёмов 1,54-го водного раствора нитрата серебра и 0,Э4-го раствора бромфенолового синего в ацетоне. Метод количественного определения рицида-П основан на выделении его из исследуемых проб путём настаивания с метиловым спиртом, на хроматографической очистке,на минерализации выделенного препарата и определении фосфат-ионов.

2.1.2.    Метрологическая характеристика метода.

Диапазон определяемых концентраций-Б-70 мкг Предел обнаружения-0,05 мг/м³

Среднее значение определения-91,674 Число параллельных определений-5 Стандартное отклонение-3,124

Доверительный интервал среднего при р*0,95 ил*6 91,67*3,69 Обнаружению рицида-П могут мешать органические соединения фосфора, имеющие близкие значения

2.2.    Реактивы и материалы.

2.2.1. К методу хроматографии в тонком слое сорбента.

Хлороформ, ч.д.а., ГОСТ 20015-74

Бензол, ч.д.а., ГОСТ 5955-75

Эфир диэтиловый,х.ч., ГОСТ 6262-79

Спирт метиловый, х.ч., ГОСТ 69495-77

Бром$еноловый синий/индикатор/, ТУ 6-09-1058-76

Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79

Нитрат серебра, х.ч., ГОСТ 1277-75

Уксусная кислота,х.ч., ГОСТ 61-75, 44 водный раствор

Силикаголь КСК, ТУ 6-09-2523-72

Гипс медицинский, ГОСТ 21.8-74

Основной стандартный раствор: ICO мг рицида-П/х.ч./ растворяют в ме-

45*.

таловом спирте в мерной колбе емкостью 100 мл к объем раствора доводят метиловым с литром до метки.В I мл приготовленного раствора содержится 1 мг рицида-11.

Рабочий стшщартннй раствор:5,0 мд основного стандартного раствора вносят в мерную колбу на 100 мд .объем жидкости в колбе доводят метиловым спиртом до метки.

Система растворителей: I.бензол - дивталовый эфир /8:2 /.

Раствор для проявления хроматограммы: смесь равных объемов I,5fc-ro водного раствора нитрата серебра и 0,Э$-го ацетонового раствора бромфенолового синего.Для изменении окраски фона пластинки посла опрыскивания проявителем готовят 4% раствор уксусной кислоты.

2.2.2. К фотометрическое методу.

Кислота азотная,ч..ГОСТ 4461-77 Кислота серная,ч.д.а..ГОСТ 204-77

Гидразин сульфат,ч..ГОСТ 5041-74 ,0,15#~ный водный раствор Аммоний молибдат.х.ч.,ГОСТ 3765-78

Раствор аммония молибдата: к 60 мл дистиллированной воды прибавляют 14 мд концентрированной серной кислоты и в горячий раствор прибавляют I г молибдата аммония.Смась перемешивают, охлаждают ж объем жидкости доводят дистиллированной водой до 100 ми.

Кадий фосфат однозамащешшй.х.ч. .ГОСТ 4196-75

Основной стандартный раствор одиозные «в ня ого фосфата кадия: в мерную колбу емкостью 100 мд вносят 0.047 г одно замененного фосфата каш. который растворяют в небольшом количестве воды и объем жидкости в колбе доводят водой до метки.

Рабочий стандартный раствор однозаыаденаого фосфата калия: 10 мл обменного стандартного раствора переносят в колбу на 100 мл и объем жидкости доводят водой до метки.В I мл этого раствора содержится 0,047 иг однозаиенбныого фосфата калия,что соответствует 0,1 мг рм-ода-11.

2.3. Приборы и посуда.

Ворон»* делительные,ГОСТ 8613-75

453

Камера для хроматографирования

Пульверизаторы стеклянные,ГОСТ 10391-74

Пластинки стеклянные,размером 16x18 см

Шприц медицинский емкостью I мд, 17-64-1-378-78

Фо то э л октроколориметр однолучевой К&0.Г0СТ 8.298-78

Весы аналитические,ГОСТ 19491-74

Весы технические,разновесы,ТУ 64-I-I065-78

Стаканы химические,ГОСТ 1770-74

Колбы мерные емкостью 50 мл и 100 мд,ГОСТ 1770-74

Цилиндры мерные,ГОСТ 1770-74

Шшетки мерные,ГОСТ 20292-74

Микропипетки,ГОСТ I770-74E

Стеклянные палочки,ХУ 64-2-236-78

Фарфоровая ступка,ГОСТ 9147-80

Воздушные холодильники,ГОСТ 9490-70

Баня водяная,ТУ 46-22-603-76

Колбы Къельдаля емкостью 50 мл

Шкаф электрический сушильный,ХУ 64-1-14Л-72

Фильтры бездельные "синяя ленте* ТУ 6-09-Я678-77

Грушевидные колбы для отгонки растворителей,ГОСТ 10394-72

Испаритель ротационный ИР-1М.ТУ-26-И-917-74

Гофрированная стеклянная трубка длиной 12 см

Поглотители,ТУ 26-II-I08I-75

Аспирационное устройство,ТУ-64-1-862-77

Патроны для фильтров металлические 2.4.Отбор проб н подготовка к определению.

2.4.1.Отбор проб воздуха.Для отбора проб воздуха применяют систему, оо стоя цуг из Зяхьтра "синяя лента", последовательно соединенных с шш двух поглотителей,в халдом из которых содержится по 10 мх метилового спирта и по 10 ил дистиллированно# воды к гофрированной ствЮдиной тру-454,

б к* с обезжиренной гигроскопической ватой, между двумя слоями кото-ройнаходится 2-3 г силикагеля.Через ату систему протягивают воздух о помощью аспирационного уотройотва со скоростью 2-5 л/мин в течение 25 мин.

2.4.2. Приготовление стеклянных пластинок для хроматографирования. Стеклянные пластинки / 16x18 см / ицательно моют раствором хромовой смеси,промывают проточной,а затем дасталированной водой и высушивают на воздухе.Взвешивают 4.6 г силикагеля,просеянного через сито 100 меш ,0,23 г гипса,растирают их в фарфоровой ступке с 10 мл дистнли-роваяной воды. Подученную суспензию наносят на хрома то графическую пластинку,равномерно распределяют ее и оставляют на воздухе на горизонтальной поверхности до получения высушенного слоя сорбента.Приготовленные таким образом пластинки сохраняют в эксикаторе над прокаленным хлоридом кальция.

2.4.3.    Построение калибровочного графика.Для построения калибровочного графика в ряд колб емкостью 25 мл вносят по 0,05, 0,1, 0,2,

0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0.9 мд рабочего стандартного раствора одно заме иного фосфата калия. Затем во все колбы прибавляют дистиллированную воду до 12 мд.В колдую колбу вносят по 3 мл раствора молибдата аммония и 1,5 мд раствора сульфата гидразина. Колбы закрывают пробками,снабженными воздушными холодильниками,и нагревают на кипящей водяной б«не на протяжении 10 мла.Ноод этого «пакости в колбах охлаждают и доводят их объема дисталированной водой до 20 мл. Оптическую плотность окрашенных в синий, цвет растворов определяют через 10 ман. с помощью д^гоэлектроколориметра однолучевого КДО /светофильтр красный >5, кювета с толщиной слоя жидкости эО мл/.В качестве раствора сравнения используют смесь указан.па выше реактивов. Калибровочный график строят в координатах "оптическая плотность - количество однозамеденного фосфата калия в пересчете на рицид-5".

Калибровочный грарик определения рицида-U указанным методом приводится на рисунке I.

455.

Рис Л. Калибровочный график для фотоколориметрическобо определения рицида-П.

Согласно нашим исследованиям светопоглощвние окрашенных растворов подчиняется закону Еугера-Дамберта-Бера в пределах концентраций рицида-П от 0,005 до 0,07 иг в пробе,

2.5. Проведение определения.

2.5.1. Извлечение рнцида-П.Из фильтра “синяя лента" рицид-Ц извлекают дважды 10 мл метилового спирта.Извлечение рицида-П из ваты и силикагеля, находящихся в гофрированной трубке,проводят аналогично.Полученные извлечения объедишшт^створемн,находящимися в поглотителях. Объединенные извлечения вносят в грушевидную колбу емкостью 200 мд. Поглотители обмывают 10 м* метилового спирта, историй переносят в ту хе грушевидную колбу. Растворитель /метиловый спирт/ из грушевидно* колбы выпаривают досуха на ротационном испарителе.

2.5.2. Условия хроматографвроваяня.Сухой остаток растворяют в 0,5 ил ацетона.С помощью медицинского шприца ни линию старте, находящуюся на 2 см выше нижнего края.хроматогрфгчеснюй пластинка,слава наносят 0,5 мл раствора сухого остатка в ацетоне в виде пряю* линии длиной 8 см. Справа на линяю старта яааосят ОД мл оставшегося раствора сухого остатка в ацетоне и ОД mi рабочего стандартного раствора рнцида-П

456

Ижастяяку подсушивают на воздухе ■ вносят в камеру для хроматографирования, содержащую систему растворителей: бензол-диэтиловый эфир

/8:2/.После того как система растворителей поднимется на пластинке на 10 см выше линии старта, пластинку вынимают из камеры н оставляют на воздухе до вы сушив Ш{ия. Левую часть пластинки /8 см/ закрывают чистым стеклом,а правую часть /8 см/ - опрыскивают смесью равных объемов I,ЙЬ-го равгвора нитрата серебра в дистиллированной воде и 0.3%-го раствора бромфенолового синего в ацетоне.Хроматограмм)' нагревают 16 мин при 50°с и затем опрыскивают 4% раствором уксусной кислоты.

Риццд-П обнаруживается в виде синих пятен на желтом фоне./С/ ри-цида-П в системе растворителей:бензол-дизталовый эфир /8:2/ составляет 0,45.

На уровне проявленных пятен с левой стороны пластинки /8 см/ снимают слой сорбенте и переносят на стеклянный пористый фильтр Шота, фунгицид элюируют из сорбента 10-20 мл ацетона.

В колбу Кьельдадя вносят ацетоновый элюат,который выпаривают досуха на водяной бане.Затем в колбу вносят I мл концентрированной серной и 3 мл концентрированной азотной кис-.от.Солзрлише кол**ы в течение одного часа нагревают на открытом пламени газовой горелки до просветления жидкости и выделения обильных белых иароэ.йри этом периодически прибавляют но каплям водны!¹ раствор азотно'! кислоты /1:1/.

После охлаждения жидкости ее количественно переносят в мерную колбу емкостью 26 мл,прибавляют дистиллированную воду до 12 мл.З мл раствора молибдата ашонжя ж 1,6 мл раствора сульфата гидразина. Колбу закрывают пробкой,снабженной воздушным холодильником,я нагревают на кипящей водяной бане на протяжении 10 мин.После этого смесь охлаждают и доводят дистиллированной водой до 20 мл.

Оптическую плотность окрашенного в синий цвет раствора измеряют через 10 мин с помощью однолучевого фотоэлектрокалориметра КФО /светофильтр красный ХЬ.ковета с рабочей длиной эО юл/.Раствором сравнения

457

служат смесь указанных выше реактивов.В тех случаях,когда оптическая плотность о1фаленного раствора превышает 0,'проводят повторный опыт, при котором окрашенный раствор разбавляют равным объемом воды,измеряют оптическую плотность и производят расчет содержания препарата по калибровочному графику.Полученный результат умножают на коэффициент разведения /К/.

Расчет содержания рицида-П в пробе проводят по калибровочному графику,построенному по однозамещенному (фосфату кали_я.Расчет содержания рицида-il в воздухе /х/ в мг/м³ проводят по следующей формуле:

а-ГУ_А.К У_Сг-*. -Уз

где: a-количество рицида-П,найденное по калибровочному графику,мкг у-общий объем раствора пробы после минерализации, мя ,

у^-объем пробы шшорализата, взятай для анализа, мл . у^-обищй объем раствора сухого остатка в ацетоне /0,6 мл/ , К-коэффиииент разведения •

У₈-объец раствора сухого остатка /0,5 мл/,нанесенного на линию старта в левой часта хроматографической пластинки I У_с^объем воздуха, отобранный для анализа /л/, приведенный к стандартным условиям по формуле:

„ А*293 ^р ЪТ /273f L /.760 где: у^оСъон воздуха,отобранный для анализа /л/ ,

р-барометричесше давление /им рт.ст./,

^-температура воздуха в месте отбора проб /°<У.

3. Требования безопасности.

Необходимо соблюдать общепризнанные правила безопасности при раоо-

те с органическими растворителями, концентрированными кислотами и токоическими веществами.

4. Настоящая методика разработана на кафедре токсикологической и аналитической химии и кафодре гигиены труда Львовского медицинокого янотитута. - Ризой Л.В., Крамаренко В.Ф. Гкегоцким м.И.