МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

Масла эфирные

АНАЛИЗ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ НА КАПИЛЛЯРНЫХ КОЛОНКАХ

Общий метод

(ISO 7609:1985, ЮТ)

Издание официальное

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Автономной некоммерческой организацией «ПАРФЮМТЕСТ» (АНО «ПАРФЮМТЕСТ») на основе собственного аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в пункте 5

2    ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 сентября 2014 г. № 70-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004—97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации Армения AM Минэкономики Республики Армения Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь Киргизия KG Кыргызстандарт Молдова MD Молдова-Стандарт Россия RU Росстандарт

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 13 октября 2014 г. № 1315-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 7609-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2016 г.

5    Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 7609:1985 Essential oils -Analysis by gas chromatography on capillary columns - General method (Масла эфирные. Анализ методом газовой хроматографии на капиллярных колонках. Общий метод).

Международный стандарт разработан Техническим комитетом по стандартизации ISO/TC217 «Косметика» Международной организации по стандартизации (ISO).

Перевод с английского языка (еп).

Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеется в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии.

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам приведены в дополнительном приложении ДА.

Степень соответствия - идентичная (ЮТ) ¹

ГОСТ ISO 7609-2014

Измеряют расстояние по базовой линии между вершинами соседних пиков нормальных алканов, имеющих пип + 1 атомов углерода, появляющееся до и после рассматриваемого пика. Это расстояние обозначается Д_у и выражается в миллиметрах.

9.2 Вычисление индекса удерживания

9.2.1    Изотермические условия

Индекс удерживания / вычисляют по формуле

I = _{100    +    10}оп.

log ₊

где d*_x - расстояние в миллиметрах между вершиной пика, индекс удерживания которого рассчитывают, и вершиной пика метана (см. 9.1.1);

d*_n - расстояние в миллиметрах между вершиной пика нормального алкана с п атомами углерода и вершиной пика метана (см. 9.1.1);

^п+1 - расстояние в миллиметрах между вершиной пика нормального алкана с п + 1 атомами

углерода и вершиной пика метана (см. 9.1.1).

Примечание -Формула верна только в случае d_n+1>d_x>d_n.

9.2.2    Проведение анализа с использованием линейного программирования температуры от момента ввода пробы

Расчет верен только для компонентов, имеющих времена удерживания, которые входят в линейную зону программирования температуры.

Индекс удерживания У вычисляют по формуле

Y = 100— + 100п,

Ау

где Ах - расстояние в миллиметрах между вершиной пика, индекс которого определяют, и вершиной пика нормального алкана с п атомами углерода (см. 9.1.2);

Ау- расстояние в миллиметрах между вершиной пика нормального алкана с п атомами углерода и вершиной пика нормального алкана с п + 1 атомами углерода (см. 9.1.2).

Примечание - Если используют различные программы температур, то индекс удерживания рассчитать невозможно.

10 Методы определения

10.1    Общие условия

10.1.1    Хроматограмма эфирного масла

Запись хроматограммы оговорена в соответствующем стандарте. Температура и сопутствующие условия должны быть такими же, как и используемые для определения эффективности колонки (см. 8.2).

Для определения некоторых компонентов эфирных масел стандарт может рекомендовать использование изотермических условий при определенной температуре. В каждом случае скорость потока должна контролироваться так, чтобы разделение соответствовало стандарту.

После стабилизации температуры колонки вводится соответствующее количество пробы (примерно 10"¹ г).

Таким образом, получают хроматограмму А.

10.2 Метод внутреннего стандарта

В одних и тех же рабочих условиях записывают хроматограммы эфирного масла и смеси этого масла с внутренним стандартом (4.5). Необходимо, чтобы определяемые продукты отделялись на хроматограмме от других компонентов эфирного масла, и пик внутреннего стандарта не накладывался ни на какие компоненты масла.

7

10.2.1    Определение калибровочного коэффициента

Когда для количественных расчетов определяют калибровочный коэффициент исследуемого компонента по отношению к внутреннему стандарту, количества внутреннего стандарта (4.5) и определяемого вещества (4.6) должны быть такими, чтобы соответствующие площади пиков были приблизительно равными.

Если используют растворитель, то он должен быть оговорен в соответствующем стандарте.

После стабилизации температуры колонки вводят необходимое количество данной смеси, и анализ выполняют в условиях, оговоренных в 10.1.1.

Таким образом, получают хроматограмму В.

Калибровочный коэффициент К компонента относительно внутреннего стандарта вычисляют по формуле

.d_Rxm_E’

где    - площадь пика в единицах интегратора, соответствующая определяемому веществу, ка

либровочный коэффициент которого рассчитывается;

- площадь пика в единицах интегратора, соответсвующая внутреннему стандарту;

?71r - масса определяемого вещества, мг;

т_Е - масса внутреннего стандарта, мг.

10.2.2    Определение

Если соответствующий стандарт предусматривает использование внутреннего стандарта, то необходимо приготовить смесь не менее 0, 001 г подходящих количеств эфирного масла и внутреннего стандарта. Выбирают количество внутреннего стандарта таким, чтобы площадь пика определяемого компонента и внутреннего стандарта были приблизительно равны.

После стабилизации температуры колонки вводят соответствующее количество этой смеси (порядка 10"⁶ г) и проводят анализ в условиях, указанных в 10.1.1.

Таким образом, получают хроматограмму С.

10.3 Метод добавок

Если использование метода внутреннего стандарта для практического определения невозможно, то используют метод добавок.

Для этого вводят необходимое количество эфирного масла, где х- определяемый компонент, а у- компонент, дающий пик, близкий к пику х на получаемой хроматограмме D.

Затем приготавливают смесь из т г эфирного масла и m_R г стандартного вещества (4.4), массой не более 0, 001 г, соответствующую определяемому компоненту х.

Вводят данную смесь.

Таким образом, получают хроматограмму Е.

10.4 Метод внутренней нормализации

Данный метод не является точным методом определения, но допускает грубую оценку соответствующих концентраций различных компонентов, элюированных из смеси, путем сравнения их площадей, но не дает точных процентов по массе.

11 Обработка результатов

ГОСТ ISO 7609-2014

A-g - площадь пика в единицах интегратора, соответствующая внуреннему стандарту (см. 10.2.2);

т - масса эфирного масла, мг;

Ше - масса внутреннего стандарта, мг;

К - калибровочный коэффициент для определяемого компонента, соответствующего внутреннему стандарту.

11.2 Метод добавок

Содержание с_х, выраженное в процентах по массе, определяемого компонента вычисляют по формуле

m_R г    _f

с_х =-х —_:-х 100 для Т >г,

m г — г

где    - масса стандартного вещества, г (4.4);

m - масса эфирного масла, г;

где А_х - площадь пика, соответствующая компоненту X на хроматограмме D (10.3);

Ау - площадь пика, соответствующая компоненту Y, близко расположенному к X на хроматограмме D;

где А_х - площадь пика, соответствующая компоненту X на хроматограмме Е (см. 10.3).

А_у- площадь пика, соответствующая компоненту Y, близко расположенному к X на хроматограмме Е (см. 10.3).

11.3 Метод внутренней нормализации

Когда порция пробы полностью испаряется (эфирное масло без осадка) в выбранных условиях и получаемая хроматограмма не содержит много маленьких пиков, то содержание с_х, выраженное в процентах, определяемого компонента вычисляют по формуле

^хюо

1 А

где А% - площадь пика в единицах интегратора, соответствующая определяемому компоненту;

Y>A- сумма в единицах интегратора площадей всех пиков.

11.4 Результаты и воспроизводимость

В качестве результата для калибровочного коэффициента К и содержания с_х определяемого компонента используют среднее значение нескольких (не менее трех) определений, осуществляемых на той же пробе.

Значения, используемые для расчетов, не должны отличаться от среднего более чем на несколько процентов (в основном 2,5 %). Этот процент и число определений будут оговорены в различных методиках или в соответствующих стандартах.

12 Результаты

Раздел должен содержать следующую информацию:

a)    тип используемого оборудования;

b)    характеристики колонки (материал, длина, внутренний диаметр, неподвижная фаза и носитель, соотношение неподвижной фазы и носителя, гранулометрия носителя, температура колонки или температура при программировании);

9

c)    характеристики системы ввода проб (тип и температура);

d)    характеристики детектора (тип и температура);

e)    газ-носитель и скорость потока;

f)    характеристики записывающего устройства (чувствительность, скорость бумаги, быстродействие);

д) идентификацию пробы.

10

Приложение ДА (справочное)

Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам

Таблица ДА.1

Обозначение и наименование международного стандарта Степень соответствия Обозначение и наименование межгосударственного стандарта ISO 356:1996 Масла эфирные. Подготовка образцов для испытаний ЮТ ГОСТ ISO 356-2014Масла эфирные. Подготовка проб для испытаний ISO 7359:1985 Масла эфирные. Анализ методом газовой хроматографии на насадочных колонках. Общий метод - * * Соответствующий межгосударственный стандарт отсутствует. До его принятия рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта.

11

УДК 665.58:006.354    МКС 71.100.60    ЮТ

Ключевые слова: эфирные масла, газовая хроматография, капиллярные колонки

Подписано в печать 16.03.2015. Формат 60x84V₈.

Уел. печ. л. 1,86. Тираж 31 экз. Зак. 554

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ»

123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru    info@gostinfo.ru

ГОСТ ISO 7609-2014

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ, 2015

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

III

Введение

В связи с тем, что описание методов анализа газовой хроматографии очень обширно, было решено установить, с одной стороны, общие методы, предоставляющие информацию обо всех текущих параметрах, приборах, продуктах, методах, расчетных формулах и т.д., и, с другой стороны -стандарты с краткими указаниями по определению специфических компонентов эфирных масел с необходимыми для данного случая рекомендациями.

В этих стандартах будут ссылки не только на настоящий стандарт по хроматографическому анализу на капиллярных колонках, но и на ISO 7359 по анализу на набивных колонках.

IV

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

Масла эфирные

АНАЛИЗ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ НА КАПИЛЛЯРНЫХ КОЛОНКАХ

Общий метод

Essential Oils. Analysis by gas chromatography on capillary columns. General method

Дата введения — 2016—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает общий метод анализа эфирных масел методом газовой хроматографии на капиллярных колонках для определения содержания специфических составляющих и/или исследования характерного профиля.

2    Нормативные ссылки

Для применения настоящего стандарта необходимы следующие ссылочные документы. Для датированных ссылок применяют только указанное издание ссылочного документа, для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного документа (включая все его изменения).

ISO 356:1996 Essential oils. Preparation of test samples (Масла эфирные. Подготовка образцов для испытаний)

ISO 7359:1985 Essential oils. Analysis by gas chromatography on packed columns. General method (Масла эфирные. Анализ методом газовой хроматографии на насадочных колонках. Общий метод)

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3    Основной принцип

Анализ методом газовой хроматографии в соответствующих условиях небольшого количества¹’ эфирного масла на колонке с маленьким диаметром, но большой длины, внутренняя поверхность которой должна быть предварительно покрыта либо соответствующей неподвижной фазой напрямую, либо пропитанным носителем (колонка, покрытая изнутри пропитанным носителем).

Если требуется, проводят идентификацию различных компонентов с помощью индексов удерживания.

Количественное определение специфических компонентов проводят при измерении площадей

пиков.

4    Реактивы и материалы

Во время проведения анализа, при отсутствии иных указаний, используют только реактивы известной степени чистоты и свежеприготовленные растворы.

¹⁵ Вводимая порция пробы не должна насыщать колонку.

Издание официальное

4.1    Газ-носитель: водород²’, гелий или азот в зависимости от вида используемого детектора. Если применяют детектор, использующий газ-носитель, который не был предусмотрен, его необходимо установить особо.

4.1.1    Дополнительные газы: газы, дополнительно используемые в детекторе; для пламенноионизационного детектора - воздух и водород высокой степени чистоты.

4.2    Вещество для проверки химической инертности колонки: линалилацетат, чистота не менее 98 %.

4.3    Вещества для определения эффективности колонки³’

4.3.1    Линалол, чистота не менее 99 %, определяемая хроматографически.

4.3.2    Метан, чистота не менее 99 %, определяемая хроматографически.

4.4    Стандартные вещества, вещества, соответствующие определяемым или обнаруживаемым компонентам. Стандартные вещества будут указаны в каждом соответствующем стандарте.

4.5    Внутренний стандарт

Внутренний стандарт должен быть указан отдельно в каждом соответствующем стандарте, он должен элюировать в непосредственной близости от определяемого компонента и пик его на хроматограмме не должен накладываться на пики других компонентов эфирного масла.

4.6    Нормальные алканы, чистота не менее 95 %, определяемая хромаграфически. Ряд нормальных алканов, используемых в специальном стандарте, зависит от индексов удерживания компонентов, определяемых в выбранных условиях.

Примечание - Нормальные алканы используются только тогда, когда они необходимы для определения индексов удерживания.

4.7    Контрольная смесь

Приготавливают смесь, содержащую более или менее равные пропорции:

-    лимонена;

-    ацетофенона;

-линалола;

-    линалилацетата;

-    нафталина;

-    коричного спирта.

Все эти компоненты должны иметь чистоту не менее 95 %, определяемую хроматографичекси.

Примечание - Могут использоваться и другие продукты, которые должны оговариваться в каждом соответствующем стандарте.

5 Оборудование

5.1    Хроматограф, оснащенный специальной системой ввода для капиллярных колонок, позволяющей ввести вещество в количестве 10"⁶ г с подходящим детектором и устройством термостатиро-вания.

Системы ввода проб и детектирования должны быть оснащены устройствами независимого регулирования соответствующих температур.

5.2    Колонка, изготовленная из инертного материала (например, стекло или нержавеющая сталь, кварц или плавленый кварц), с внутренним диаметром от 0,2 до 0,5 мм и длиной от 15 до 100 м.

Тип неподвижной фазы должен быть указан отдельно в каждом соответствующем стандарте. В настоящее время часто используют неподвижные фазы - метил- или фенилполисилоксаны и полиэтиленгликоли с концевыми спиртовыми группами, которые могут быть свободными или этерифеци-рованными.

5.3    Записывающее устройство и электронный интегратор, характеристики которых должны соответствовать остальному оборудованию.

ГОСТ ISO 7609-2014

6    Подготовка пробы для анализа

Метод подготовки пробы для анализа приведен в ISO 356.

Если вводимая проба должна подвергнуться специальной обработке, то это должно быть отмечено в соответствующем стандарте.

7    Проведение анализа

7.1    Температура

Температура термостата, испарителя и детектора должна быть указана отдельно в каждом соответствующем стандарте.

7.2    Скорость потока газа-носителя

Регулировать скорость потока нужно так, чтобы достигнуть необходимой эффективности (см.

8.2).

7.3 Скорость потока вспомогательных газов

Необходимо обратиться к инструкциям изготовителя, чтобы достигнуть оптимальной чувствительности детектора.

8 Характеристики колонки

8.1    Испытание на химическую инертность

Вводят пробу линалилацетата в условиях проведения анализа (см. 7.1).

Должен быть получен только один пик (в пределах определения чистоты).

8.2    Эффективность колонки

Необходимо определить эффективность колонки с помощью пика линалола при постоянной температуре 130 °С. Число теоретических тарелок /V, которое должно быть не менее 25 ООО, рассчитывают по одной из следующих формул:

Формула № 1 (см. рисунок 1):

Формула № 2:

где d[, - исправленное расстояние удерживания, выраженное в единицах длины (расстояние удер-

живания пика линалола минус расстояние удерживания пика воздуха или пика метана при температуре 130 °С, сравнимого с пиком воздуха);

(л) - расстояние, выраженное в тех же единицах длины, что и расстояние удерживания между двумя точками пересечения базовой линии с двумя касательными в точках перегиба пика линалола;

Ь- ширина в миллиметрах пика определяемого вещества (линалола) на половине высоты пика. ⁴

Скорость бумаги записывающего устройства должна быть такой, чтобы СО была не менее 10 мм для достижения высокой точности.

Скорость бумаги записывающего устройства должна быть такой, чтобы b была не менее 5 мм для достижения высокой точности.

8.3 Разрешающая способность и степень разделения

Для определения разрешающей способности и/или степени разделения вводят необходимое количество контрольной смеси (4.7) при определенных условиях анализа.

8.3.1 Определение разрешающей способности (см. рисунок 2)

I п

Критерий разделения R двух смежных потоков пиков I и II вычисляют по формуле:

д ₌ 2

d_r,-_T| - расстояние удерживания пика I, мм; d_ri'ii-| - расстояние удерживания пика II, мм;

ГОСТ ISO 7609-2014

й)ф - ширина основания пика I, мм;

- ширина основания пика II, мм.

Если Wj=6Jjj, то R вычисляют по формуле:

^    _    ^rCtt)~^r(Q

со    4а

где (Т - стандарт отклонения (см. рисунок 1).

Если расстояние между двумя пиками    4(7,    то    критерий    разделения    R    =    1    (см.

рисунок 2).

Если два пика не полностью разделяются, то касательные в точках перегиба двух пиков пересекаются в точке С. Для полного разделения расстояние между пиками должно равняться

^г(П') ^— ^г(ГГ откуда R = 1,5 (см. рисунок 3).

I п

8.3.2 Определение степени разделения (см. рисунок 4)

Проводят прямую, связывающую вершины двух пиков по касательной. От базовой линии проводят перпендикуляр через минимум между двумя пиками. Измеряют расстояние h по перпендикуляру между базовой линией и точкой пересечения с прямой, связывающей вершины двух пиков.

Измеряют расстояние v по перпендикуляру от базовой линии до минимума между двумя пика-Степень разделения р, выраженную в процентах, вычисляют по формуле

5

100(7?-v)

^p=—^—

8.3.3 Контроль степени разделения при программировании температуры

Используют следующие условия:

-    колонка с полиэтиленгликолем или диметилполисилоксаном;

-    температура, запрограммированная от 80 °С до 220 °С при скорости от 2 до 3 °С/мин.

Скорость газа-носителя должна допускать элюирование всех компонентов контрольной смеси

(4.7) и нормальных алканов (4.6), необходимых для определения индексов удерживания до конца программы.

8.3.3.1    Вводят определенное количество контрольной смеси (4.7).

На хроматограмме:

a)    в случае колонки с диметилполисилоксаном пики лимонена и ацетофенона делятся примерно на 95 % (см. 8.3.2);

b)    в случае колонки с полиэтиленгликолем (М_г= 20 000) пики линалола и линалилацетата должны иметь разделения не менее 95 % (см. 8.3.2).

Если требуется другая насадка по стандарту, то это будет оговорено.

8.3.3.2    Вводят необходимое количество контрольной смеси и рассчитывают индексы удерживания (раздел 9) компонентов исследуемой смеси.

В случае колонки с диметилполисилоксаном используют алканы от Сю до Сю.

В случае колонки с полиэтиленгликолем (М_г= 20 000) используют алканы от Сц до С₂4

Индексы удерживания, рассчитанные таким образом, характеризуют полярность колонки в зависимости от различных структурных особенностей анализируемых компонентов.

Результаты, полученные на различных колонках с одинаковой насадкой, могут быть сравнимы, если индексы удерживания компонентов исследуемой смеси лишь незначительно различаются на разных колонках .

9 Определение индексов удерживания

Если необходимо определить индексы удерживания, то готовят смесь из нормальных алканов в заданной пропорции, включая п-пентан.

Нормальные алканы выбирают в соответствии с рядом ожидаемых индексов удерживания.

После стабилизации температуры колонки вводят определенное количество смеси и ведут анализ в условиях, оговоренных в 10.1.1.

Таким образом, получают хроматограмму В.

9.1    Измерение индексов удерживания

Сравнивают хроматограммы А (см. 10.1.1) и В (см. раздел 9) и отмечают на хроматограмме В пики, соответствующие измерениям.

9.1.1    Изотермические условия

Рассчитывают разницу между расстояниями удерживания вершины рассматриваемого пика и

пика метана. Эта разница обозначается d’_x и выражается в миллиметрах. Рассчитывают разницу между расстояниями удерживания вершины пика метана и вершины пика нормального алкана, появляющегося непосредственно перед рассматриваемым пиком; эта разница обозначается d^ и выражается в миллиметрах.

Рассчитывают разницу между расстояниями удерживания вершины пика метана и вершины пика нормального алкана, появляющегося сразу после рассматриваемого пика. Эта разница обозначается d^fn+1 и выражается в миллиметрах.

9.1.2    Проведение анализа с использованием линейного программирования температуры от момента ввода пробы

Измеряют расстояние по базовой линии между вершиной пика (индекс удерживания которого определяют) и вершиной пика нормального алкана (n-атомов углерода), появляющегося непосредственно перед рассматриваемым пиком. Это расстояние обозначают Д_х и выражают в миллиметрах.

Предел этих отклонений будет оговорен.

1

ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

2

¹¹ При использовании этого газа необходимо строгое соблюдение правил безопасности.

²⁾ При определении эффективности колонки могут быть использованы другие вещества; они должны быть выделены в каждом соответствующем стандарте.

3

4