Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ    1.2—2009    «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты

межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Научно-исследовательским институтом прикладной и экспериментальной экологии Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный аграрный университет» (ФГОУ ВПО «Кубанский ГАУ»)

2    ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол №41 от 23—24 мая 2012 г.)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—97	Код страны по МК (ИСО 3166) 004—97	Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
Азербайджан	AZ	Азгосстандарт
Беларусь	BY	Госстандарт Республики Беларусь
Кыргызстан	KG	Кыргызстандарт
Молдова	MD	Молдова-Стандарт
Российская Федерация	RU	Росстандарт
Таджикистан	TJ	Т аджикстандарт

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 9 октября 2012 г. № 474-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31481-2012 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2013 г.

5    Настоящий стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 52698-2006

6    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта публикуется в указателе «Национальные стандарты».

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в указателе «Национальные стандарты», а текст изменений — в информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована в информационном указателе «Национальные стандарты»

© Стандартинформ, 2012

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

воспроизводимости R. Предел воспроизводимости для всех определяемых хлорорганических пестицидов составляет 40 %.

4.5.5 Значения показателей точности, повторяемости и воспроизводимости представлены в таблице 6.

Таблица 6

Наименование соединения Показатель повторяемости аг, % Показатель воспроизводимости CSR, % Показатель точности (при вероятности Р = 0,95) + 8 , % а-ГХЦГ 7 14 30 у-ГХЦГ ддд ДДЭ ДДТ Примечание — Систематическая составляющая погрешности незначима.

5    Оформление результатов анализа

Результат анализа X, мг/кг, в документах, предусматривающих его использование, может быть представлен в виде

Х+ А, мг/кг, Р= 0,95,

где А — показатель точности с принятой вероятностью Р = 0,95, вычисляемый по формуле

А = 50,01 X,    (4)

где 5 — значение показателя точности по таблице 6.

Допускается результат анализа в документах, выдаваемых лабораторией, представлять в виде X + А_л, мг/кг, Р = 0,95, при условии Д_л < А, где+ А_л —значение характеристики погрешности результатов измерений, установленное при реализации методики в лаборатории и обеспечиваемое контролем стабильности результатов измерений.

6    Контроль качества результатов измерений

6.1    Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории

6.1.1    Общие положения

Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории предусматривает:

-    контроль исполнителем процедуры выполнения измерений на основе оценки приемлемости результатов в условиях повторяемости;

-    контроль исполнителем процедуры выполнения измерений на основе оценки погрешности измерений при реализации отдельной контрольной процедуры;

-    контроль стабильности результатов измерений на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения (СКО) повторяемости, СКО промежуточной (внутрилабораторной) прецизионности и погрешности.

Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шухарта по [3].

Периодичность контроля исполнителем процедуры выполнения анализа на основе оценки погрешности измерений при реализации отдельной контрольной процедуры, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.

Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (сходимости) и воспроизводимости, осуществляют по [4].

6.1.2    Контроль исполнителем процедуры выполнения измерений

Контроль исполнителем процедуры выполнения измерений проводят с использованием образцов для контроля. В качестве таких образцов применяют (в порядке понижения приоритетности) стандартные образцы состава анализируемой продукции; образцы, для которых содержание анализируемых

ГОСТ 31481-2012

компонентов установлено на основании межлабораторного сличительного эксперимента; образцы, многократно проанализированные в лаборатории данным методом.

Сравнивают результат контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К. Результат контрольной процедуры вычисляют по формуле

К_к=\Х-С\,    (5)

где X — результат определения содержания пестицидов в образце для контроля, мг/кг;

С — опорное (аттестованное) значение, мг/кг.

В качестве нормы контроля К принимают значение характеристики погрешности измерений, установленное в лаборатории при реализации методики (Л_л, мг/кг); если эти значения еще не установлены (например, при освоении методики), то вместо А_л испол ьзуют значение Д. Качество контрольной процедуры признаютудовлетворительным, если К_к<К. При невыполнении неравенства (2) процедуру контроля повторяют. При повторном неудовлетворительном результате находят и устраняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам.

6.2 Оценка приемлемости результатов, получаемых в условиях воспроизводимости

Расхождение между результатами, полученными в двух лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости.

При выполнении этого условия приемлемы оба результата анализа, и в качестве окончательного может быть использовано их среднее значение.

При превышении предела воспроизводимости могут быть использованы методы оценки приемлемости результатов измерений согласно [4].

7    Требования к квалификации оператора

К выполнению анализа и обработке его результатов допускают специалиста, имеющего высшее или среднее специальное образование или опыт работы в химической лаборатории, прошедшего соответствующий инструктаж, освоившего метод в процессе обучения и получившего удовлетворительные результаты при оперативном контроле процедуры измерений.

8    Условия выполнения анализа

При выполнении анализа в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

9 Требования безопасности

При выполнении анализа необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности по ГОСТ 12.1.030, а также требования, изложенные в технических документах на используемое оборудование и средства измерений.

Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004.

Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать допустимых значений по ГОСТ 12.1.005.

9

Приложение А (обязательное)

Аппарат АПЛ для экстракции и очистки экстрактов пестицидов перегонкой с водяным паром

1

1 — пробка; 2 — верхний шлиф конденсатора; 3 — верхний штуцер (слив воды); 4 — конденсатор; 5 — максимальный уровень конденсата; 6 — уровень сливной трубки; 7—нижний штуцер (вход воды); 8 — трехходовой кран; 9 — круглодонная колба

со шлифом; 10 — приемная пробирка со шлифом

10

ГОСТ 31481-2012

Библиография

Унифицированные правила отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденные Минздравом СССР 21.08.79 Корма для животных. Приготовление проб для испытания Карты контрольные Шухарта

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

11

УДК 636.087.07:006.354    МКС 65.120    С14

Ключевые слова: комбикорма, комбикормовое сырье, хлорорганические пестициды, ДДТ, ГХЦГ, метаболиты, газожидкостная хроматография, н-гексан, хроматографические колонки

Редактор Н.В. Таланова Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор М.И. Першина Компьютерная верстка А.Н. Золотаревой

Сдано в набор 29.10.2012. Подписано в печать 12.11.2012. Формат 60 х 84^. Бумага офсетная. Гарнитура Ариал. Печать офсетная. Уел. печ. л. 1,86. Уч.-изд. л. 1,30. Тираж 125 экз. Зак. 1019.

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru    info@gostinfo.ru

Набрано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» на ПЭВМ.

Отпечатано в филиале ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» — тип. «Московский печатник», 105062 Москва, Лялин пер., 6.

ГОСТ 31481-2012

Содержание

1    Область применения...................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................1

3    Отбор проб.........................................................2

4    Метод определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов.................2

5    Оформление результатов анализа..........................................8

6    Контроль качества результатов измерений.....................................8

7    Требования к квалификации оператора.......................................9

8    Условия выполнения анализа.............................................9

9    Требования безопасности...............................................9

Приложение А (обязательное) Аппарат АПЛ для экстракции и очистки экстрактов пестицидов

перегонкой с водяным паром..........................10

Библиография........................................................11

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ Метод определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов

Mixed fodders, raw stuff for mixed fodders. Method for determining the residual quantities of chlorine-organic pesticides

Дата введения — 2013—07—01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на комбикорма и комбикормовое сырье и устанавливает метод определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов: альфа-изомера гексахлорцик-логексана (а-ГХЦГ), гамма-изомера гексахлорцикпогексана (у-ГХЦГ), 4,4'-дихлордифенилтрихлорэта-на (ДДТ) и его метаболитов: 4,4'-дихлордифенилдихлорэтана (ДДД) и 4,4'-дихлордифенилдихлор-этилена (ДДЭ) с применением газожидкостной хроматографии.

Диапазоны измеряемых концентраций и минимально детектируемые количества определяемых соединений представлены в таблице 1.

Таблица 1 —Диапазоны концентраций хлорорганических пестицидов

Наименование соединения Диапазон измеряемых концентраций, мг/кг Минимально детектируемые количества, НГ а-ГХЦГ 0,001—0,1 0,001 у-ГХЦГ 0,001—0,1 0,001 ДДД 0,007—0,2 0,06 ДДЭ 0,007—0,1 0,06 ДДТ 0,007—0,4 0,06

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.030-81 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Защитное заземление, зануление

Издание официальное

ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 2603-79 Реактивы. Ацетон. Технические условия

ГОСТ 4166-76 Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия

ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия

ГОСТ 4220-75 Реактивы. Калий двухромовокислый. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия ГОСТ 9293-74 (ИСО 2435—73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия ГОСТ 13496.0-80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб

ГОСТ 13979.0-86 Жмыхи, шроты и горчичный порошок. Правила приемки и методы отбора проб ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры

и размеры

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть! Общие требования

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3    Отбор проб

Отбор проб и подготовка их к анализу — поГОСТ 13496.0, ГОСТ 13979.0, [1] и [2].

4    Метод определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов

4.1    Сущность метода

Метод основан на экстракции и очистке экстрактов хлорорганических пестицидов из анализируемой пробы способом дистилляции водяным паром на аппарате для экстракции и очистки экстрактов пестицидов (АПЛ) и количественном определении на газовом хроматографе, оснащенном детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) или детектором захвата электронов (ДЭЗ).

4.2    Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы

4.2.1    Весы лабораторные по ГОСТ24104 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более + 0,01 г.

4.2.2    Весы лабораторные по ГОСТ24104 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более + 0,0001 г.

4.2.3    Газовый хроматограф, оснащенный ДЭЗ или детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР).

4.2.4    АПЛ по нормативным документам государств, принявших стандарт (см. приложение А).

4.2.5    Испаритель вакуумный ротационный ИР—1М по нормативным документам государств, принявших стандарт.

4.2.6    Установка для перегонки органических растворителей, состоящая из круглодонной колбы вместимостью 1 дм³, дефлегматора длиной 30 см и диаметром 2 см, приемной колбы вместимостью 250 см³, аллонжа и водяной бани ил и колбонагревателя с температурой нагрева от 40 °С до 80 °С, снабженных регулятором температуры.

4.2.7    Шкаф сушильный по нормативным документам государств, принявших стандарт.

4.2.8    Холодильник бытовой, обеспечивающий температуру холодильной камеры 2 °С — 10 °С.

4.2.9    Микрошприц МШ-10 вместимостью 0,01 см³ по по нормативным документам государств, принявших стандарт.

4.2.10    Колбонагреватель по нормативным документам государств, принявших стандарт.

4.2.11    Баня масляная или глицериновая.

2

ГОСТ 31481-2012

4.2.12    Колонки хроматографические стеклянные для газового хроматографа длиной 1,0 м, диаметром 3 мм и длиной 1,5 м, диаметром 3 мм.

Колонки капиллярные длиной 30 м для газовой хроматографии, обеспечивающие максимальное разделение пестицидов.

4.2.13    Насадки для колонок: 5 % OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм) или 3 % OV-210 на хроматоне N-cynep (0,125 — 0,16 мм), или 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм).

4.2.14    Колбы перегонные К-1 — 250 — 29/32 по ГОСТ 25336.

4.2.15    Колбы Гр-25 — 14/23 по ГОСТ 25336.

4.2.16    Колбы мерные 2 — 50 — 2; 2 —100 — 2 по ГОСТ 1770.

4.2.17    Воронка В-56 — 80 ХС по ГОСТ 25336.

4.2.18    Колба коническая Кн-1 — 250 — 29/32 по ГОСТ 25336.

4.2.19    Цилиндры мерные 1 — 50,1 — 100 по ГОСТ 1770.

4.2.20    Пробирки с притертыми пробками градуированные вместимостью 5 см³ и 10 см³ по ГОСТ 1770.

4.2.21    Воронки делительные ВД-100 — 29/32, ВД-500 — 29/32 по ГОСТ 25336.

4.2.22    Пипетки 1 —2— 2 — 5,1 —2 —2 —10 по ГОСТ29227.

4.2.23    Насос водоструйный по ГОСТ25336.

4.2.24    Стаканы фарфоровые вместимостью 1200 см³ по ГОСТ 9147.

4.2.25    Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

4.2.26    Кислота серная, х.ч., плотностью 1,84 г/см³ по ГОСТ4204.

4.2.27    н-гексан,ч.

4.2.28    Натрий сернокислый безводный, ч, поГОСТ4166.

4.2.29    Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

4.2.30    Эфирдиэтиловый (этоксиэтан) по нормативным документам государств, принявших стандарт.

4.2.31    Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья по нормативному документу, действующему на территории государства, принявшего стандарт.

4.2.32    Стандартные образцы (ГСО) состава хлорорганических пестицидов: ДДТ, ДДД, ДДЭ, а-ГХЦГ и у-ГХЦГ или вещества гарантированной чистоты с содержанием основного вещества не менее 90 %.

4.2.33    Азот газообразный и жидкий по ГОСТ 9293.

4.2.34    Ацетон по ГОСТ 2603.

4.2.35    Калий двухромовокислый, х.ч., по ГОСТ 4220.

Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с метрологическими и техническими характеристиками не хуже, а реактивов по качеству не ниже указанных.

4.3 Подготовка к анализу

4.3.1    Очистка н-гексана

Н-гексан (2/3 объема отгонной колбы) по 4.2.27 перегоняют с помощью установки по 4.2.6, отбрасывая первую и последнюю порции отгона. Чистоту полученного н-гексана определяют с помощью газового хроматографа по 4.2.3. Для этого в коническую колбу по ГОСТ 25336 вместимостью 50 см³ помещают 10 см³ полученного н-гексана и упаривают его до объема ~ 3 см³ на колбонагревателе по 4.2.10 при температуре 65 °С в токе воздуха или азота по 4.2.33. Остаток экстракта переносят в градуированную пробирку по ГОСТ 1770 вместимостью 10 см³ и упаривают до объема 1 см³. Полученный экстракт анализируют в условиях хроматографирования пробы (см. таблицу 5). Н-гексан считают очищенным и пригодным для анализа при условии отсутствия на хроматограмме пиков, мешающих определению хлорорганических пестицидов.

4.3.2    Приготовление хромовой смеси

Для приготовления хромовой смеси в фарфоровый стакан по 4.2.24 помещают 50 г калия двухромовокислого по 4.2.35 и осторожно приливают по частям, тщательно перемешивая, 1 дм³ концентрированной серной кислоты по 4.2.26. Хромовую смесь хранят в сосуде из стекла. Срок хранения хромовой смеси неограничен.

4.3.3    Подготовка газового хроматографа

4.3.3.1 Подготовка хроматографической колонки

Сухую стеклянную колонку по 4.2.12, предварительно промытую хромовой смесью, приготовленной по 4.3.2 , этиловым спиртом, затем диэтиловым эфиром по 4.2.30, заполняют насадкой по 4.2.13 с помощью вакуумного или водоструйного насоса по 4.2.23. При этом набивку колонки периодически уплотняют, постукивая по колонке деревянной палочкой. Установленную в термостате хроматографическую колонку перед работой кондиционируют в следующем режиме: 2 ч при 100 °С; 2 ч при 150 °С; 4 ч при 200 °С; 4 ч при 220 °С. При кондиционировании колонка должна быть отключена от детектора. Конди-

ционирование следует проводить при смене колонки, а также после длительных перерыво в в работе. По окончании кондиционирования колонку охлаждают, подсоединяют к детектору и выводят хроматограф на рабочий режим.

4.3.3.2 Подготовку хроматографа к работе п роводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации.

4.3.4 Приготовление рабочих растворов хлорорганических пестицидов

4.3.4.1    Приготовление основных рабочихи промежуточных растворов хлорорганических пестицидов

Основные рабочие растворы определяемых хлорорганических пестицидов с массовой концентрацией (100 + 0,5) мг/дм³ приготавливают весовым способом отдельно для каждого хлорорганического пестицида путем растворения навески, содержащей 10 мгосновного вещества, сточностью 0,1 мг в мерной колбе по ГОСТ 1770 вместимостью 100 см³, в н-гексане, приготовленном по 4.3.1. Из основных растворов готовят промежуточные рабочие растворы массовых концентраций: 1 мг/дм³ (раствор 1), 0,1 мг/дм³ (раствор 2) и 0,01 мг/дм³ (раствор 3), перенося пипеткой в мерные колбы вместимостью 100 см³ соответственно 1 и 0,1 см³ основного раствора хлорорганического пестицида. Для приготовления промежуточного раствора 3 с содержанием 0,01 мг/дм³ в мерную колбу вместимостью 100 см³ переносят

1    см³ промежуточного раствора 1 и доводят до метки н-гексаном.

Все промежуточные растворы хранят в стеклянных флаконах с притертой пробкой или в герметично закрывающихся флаконах, снабженных пробками с тефлоновыми прокладками при температуре от

2    °С до 10 °С в течение 6 мес.

Перед приготовлением шкалы градуировочных растворов все растворы хлорорганических пестицидов выдерживают при комнатной температуре не менее 20 мин.

4.3.4.2    Приготовление шкалы градуировочных растворов

В пробирках с притертыми пробками по 4.2.20 вместимостью 5 см³ готовят шкалу градуировочных растворов для каждого хлорорганического пестицида (см. таблицы 2,3,4).

Градуировочные растворы хранят не более двух недель в стеклянных флаконах с притертой пробкой или в герметично закрывающихся флаконах, снабженных пробками с тефлоновыми прокладками при температуре от 2 °С до 10 °С.

Перед использованием все растворы хлорорганических пестицидов выдерживают при комнатной температуре не менее 20 мин.

Таблица 2 — Шкала градуировочных растворов для а-ГХЦГ и ДДЭ

Характеристика раствора Номер градуировочного раствора 1 2 3 4 5 6 7 8 Объем промежуточного раствора 3, см3 1 2 5 — — — — — Объем промежуточного раствора 2, см3 — — — 1 2 3 4* 5* Объем н-гексана, см3 4 3 0 4 3 2 1 0 Массовая концентрация хлорорганического пестицида в полученном градуировочном растворе, мг/дм3 0,002 0,004 0,01 0,01 0,04 0,06 0,08* 0,1* Масса хлорорганического пестицида в 5 Ю“3 см3 хроматографируемой пробы (10“6 мг) 0,01 0,02 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4* 0,5* * Для ДДЭ.

Таблица 3 — Шкала градуировочных растворов для у-ГХЦГ

Характеристика раствора Номер градуировочного раствора 1 2 3 4 5 6 7 Объем промежуточного раствора 3, см3 3 5 — — — — — Объем промежуточного раствора 2, см3 — — 1 2 3 4 5 Объем н-гексана, см3 2 0 4 3 2 1 0 Массовая концентрация хлорорганического пестицида в полученном градуировочном растворе, мг/дм3 0,006 0,01 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 Масса хлорорганического пестицида в 5 • 10~3 см3 хроматографируемой пробы (10“6 мг) 0,03 0,05 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5

4

Таблица 4 — Шкала градуировочных растворов для ДДТ и ДДД

Характеристика раствора Номер градуировочного раствора 1 2 3 4 5 6 7 8 Объем промежуточного раствора 2, см3 0,5* 1 2 3 4 5 — — Объем промежуточного раствора 1, см3 — — — — — — 1 2** Объем н-гексана, см3 4,5 4 3 2 1 0 4 3 Массовая концентрация хлорорганического пестицида в полученном градуировочном растворе, мг/дм3 0,01* 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,2 0,4** Масса хлорорганического пестицида в 5 ■ 10-3 см3хроматографируемой пробы (10~6 мг) 0,05* 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 1 2** * Для ДДД. ** Для ДДТ.

4.3.5    Установление градуировочной характеристики

В испаритель хроматографа микрошприцем по 4.2.9 вводят 5 • 10^-3 см³ каждого градуировочного раствора (см. таблицы 2,3,4). Каждый растворхроматографируют дважды, рассчитывая среднее значение площади пика определяемого хлорорганического пестицида на хроматограмме. Затем строят градуировочный график (используя метод наименьших квадратов), откладывая по оси абсцисс (X) массу определяемого хлорорганического пестицида (т) в градуировочном растворе, а по оси ординат (У) — усредненные площади пиков определяемого хлорорганического пестицида. Получают градуировочный график, описываемый уравнением

Y=AX,    (1)

где Л — относительный градуировочный коэффициент, который используют при вычислении результатов.

Градуировку хроматографа проводят один раз в 6 мес, а также при замене хроматографической

колонки или реактивов.

Проверку стабильности работы хроматографа проводят перед анализом серии проб по результатам хроматографирования одного из градуировочных растворов. Градуировочную характеристику считают стабильной в случае, если полученное значение концентрации градуировочного раствора отличается от аттестованного значения концентрации градуировочного раствора не более чем на 10 %. Перечень показателей, по которым проводят контроль, устанавливают в лаборатории.

Если условие стабильности градуировочной характеристики не выполняется для одного градуировочного раствора, необходимо выполнить повторное измерение этого градуировочного раствора с целью исключения неудовлетворительного результата измерения.

Если градуировочная характеристика нестабильна, выясняют и устраняют причины нестабильности и повторяют контроль с использованием других градуировочных растворов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении отклонения результатов от градуировочной характеристики строят новый градуировочный график.

Компоненты идентифицируют по абсолютным значениям времени удерживания.

4.3.6    Установление поправочного коэффициента

Поправочный коэффициент К_п, учитывающий потери при пробоподготовке, обязательно устанавливают при внедрении методики в лаборатории для каждого определяемого хлорорганического пестицида. Для установления поправочного коэффициента используют метод стандартной добавки.

Значение добавки должно составлять от 50 % до 150 % содержания определяемого хлорорганического пестицида в исходной пробе. Если содержание определяемого хлорорганического пестицида в исходной пробе меньше нижней границы диапазона измерений, то значение добавки должно в 2—3 раза превышать нижнюю границу диапазона измерений.

Параллельно проводят анализ исходной пробы, поступившей в лабораторию, без добавки и со стандартной добавкой (Сд) определяемых хпорорганических пестицидов, включая все стадии пробо-подготовки. Получают две концентрации для каждого из определяемых хлорорганических пестицидов: С_х (в пробе без стандартной добавки) и С_х + д (в пробе со стандартной добавкой). Значение поправочно-

5

го коэффициента для каждого из хлорорганических пестицидов в каждой /'-й пробе рассчитывают по формуле

_к _ ^сх+д -С_х    (2)

' г '

°д

Описанную процедуру повторяют не менее 5 раз для каждой /'-й пробы. Общее число проб, взятых для установления поправочного коэффициента, должно быть не менее 8—10. Поправочный коэффициент К_п для каждого хлорорганического пестицида рассчитывают как среднеарифметическое значение полученных коэффициентов К). Значение поправочного коэффициента для каждого определяемого хлорорганического пестицида должно быть не менее 0,6.

Поправочный коэффициент проверяют при смене оператора, партии реактивов путем анализа образцов для контроля (см. 6.1.2). При получении удовлетворительных результатов контроля используют ранее установленный К_п. В случае получения отрицательных результатов контроля /С_п устанавливают заново.

4.3.7 Подготовку проб к анализу проводят в соответствии с требованиями [2].

4.4 Проведение анализа

4.4.1    Подготовка аппарата для экстракции и очистки экстрактов хлорорганических пестицидов (АПЛ) и проведение экстракции

Аппарат для экстракции и очистки экстрактов хлорорганических пестицидов (АПЛ) — в соответствии с приложением А.

Перед началом работы все шлифованные поверхности конусов и кранов АПЛ промывают дистиллированной водой по ГОСТ 6709.

Навеску измельченного и подготовленного к анализу комбикорма или комбикормового сырья массой 10 г помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 250 см³ по ГОСТ 25336, затем добавляют 100 см³ дистиллированной воды и осторожно по стенкам колбы вливают 5 см³ концентрированной серной кислоты. Содержимое колбы осторожно круговыми движениями перемешивают, охлаждая под струей холодной водопроводной воды, чтобы температура в колбе не поднималась выше 35 °С.

Колбу с содержимым оставляют на 5 мин, после чего в нее приливают 2 см³ н-гексана приготовленного по 4.3.1, и соединяют с АПЛ, к керну трехходового крана подсоединяют приемную пробирку со шлифом вместимостью 10 см³ для предотвращения потерь через трехходовой кран. К нижнему штуцеру холодильника с помощью шлангов подсоединяют холодную водопроводную воду. Верхний штуцер также с помощью шланга подсоединяют к сливной раковине.

Через верхний шлиф конденсатора заливают дистиллированную воду до уровня сливной трубки. Туда же добавляют 2 см³ н-гексана по 4.3.1. Верхний шлиф конденсатора закрывают пробкой и ставят аппарат с круглодонной колбой на включенную масляную (глицериновую) баню или колбонагреватель, температура которых должна быть отрегулирована таким образом, чтобы кипение в колбе было равномерным без толчков и перебросов.

Для обеспечения равномерного кипения без толчков и перебросов необходимо внести в круглодонную колбу предварительно промытые и прокаленные стеклянные шарики.

Необходимо следить за уровнем конденсата в аппарате и не допускать его переброса обратно в круглодонную колбу. Для этого излишек конденсата периодически сливают с помощью трехходового крана в делительную воронку вместимостью 100 см³.

По истечении 1 ч работы аппарата с момента начала кипения содержимого отгонной колбы аппарат снимают с источника нагрева. После 10 мин охлаждения аппарата на воздухе содержимое конденсатора сливают в ту же делительную воронку, куда сливали излишек конденсата, используя для этого трехходовой кран. Водную фазу из делительной воронки сливают в коническую колбу, а гексановый слой переносят в круглодонную (отгонную) колбу вместимостью 50 см³, пропустив через слой сернокислого безводного натрия.

Водную фазу вновь помещают в делительную воронку и экстрагируют 5—8 см³ н-гексана, а также гексановую фракцию переносят в ту же круглодонную (отгонную) колбу, пропуская через слой сернокислого безводного натрия.

Гексановый экстракт упаривают на водяной бане (температура не выше 35 °С) с использованием ротационного испарителя до объема 0,3—0,5 см³, а затем досуха на воздухе или в токе азота.

Сухой остаток растворяют 1 см³ н-гексана и аликвоту из этого объема хроматографируют на газовом хроматографе.

4.4.2    Условия хроматографирования

5 • 10^-3 см³ гексанового экстракта вводят микрошприцем в испаритель газового хроматографа и анализируют в условиях, указанных в таблице 5.

6

ГОСТ 31481-2012

Таблица 5 — Условия газохроматографического разделения хпорорганических пестицидов на различных колонках

Наименование показателя Колонка 1 Колонка 2 Колонка 3 Насадка колонки 5 % OV-17 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм) 3 % OV-210 на хроматоне N-cynep (0,125 — 0,160 мм) 5 % SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм) Длина колонки, см, и внутренний диаметр, мм 100x3 100x3 100x3 100x3 150x3 Температура колонки, °С 170 210 160 190 190 Температура испарителя, °С 220 220 220 220 210 Температура детектора, °С 230 230 230 230 230 Скорость потока газа-носителя, см3/мин 40 40 35 35 60 Объем вводимой пробы, см3 5 • 10-3 5 • 10"3 5 • 10-3 5 • 10-3 5 • 10-3 Время удерживания хпорорганических пестицидов а-ГХЦГ 3 мин 10 с — 3 мин 15 с — 1 мин 20 с у-ГХЦГ 5 мин 32 с — 4 мин 22 с — 2 мин 10 с ДДЭ — 4 мин 03 с — 4 мин 37 с 7 мин 53 с ДДД — 6 мин 03 с — 6 мин 56 с 10 мин 51 с ДДТ — 7 мин 26 с — 11 мин 42 с 14 мин 00 с

4.4.3 Обработка химической посуды после проведения анализа

В круглодонную колбу помещают водно-ацетоновую смесь в соотношении 5:1, подсоединяют колбу к АПЛ и кипятят в течение 15 — 20 мин. Затем круглодонную колбу отсоединяют и АПЛ тщательно промывают дистиллированной водой. Всю вспомогательную стеклянную посуду промывают ацетоном по ГОСТ 2603, а затем дистиллированной водой.

4.5 Обработка результатов анализа

4.5.1    Концентрацию остаточных количеств хпорорганических пестицидов X, мг/кг, в анализируемой пробе вычисляют в соответствии с градуировочными графиками, с учетом потерь при пробоподго-товке по формуле

Х-^т'|ЦЮ³    (3)

m₂V₂K_u

где т₁ — масса определяемогохлорорганического пестицида, найденная по градуировочному графику,

мг;

Vj — общий объем раствора, из которого взята аликвота для хроматографирования, дм³;

т₂ — масса навески анализируемой пробы, г;

V₂ — объем аликвоты, вводимой в хроматограф, дм³;

К_п — поправочный коэффициент, учитывающий потери при пробоподготовке.

4.5.2    Вычисления проводят до третьего десятичного знака. Окончательный результат округляют до второго десятичного знака.

4.5.3    За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений.

Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предела повторяемости г. Предел повторяемости для всех определяемых хпорорганических пестицидов составляет 20 %.

4.5.4    При получении результатов анализа в двух лабораториях за окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов анализа, полученных в двух лабораториях. Расхождение между результатами анализа в двух лабораториях не должно превышать предела

7